来了来了,全方面get—— LAMP技术

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深入探索 LAMP 技术:全面解析与应用

LAMP 技术,全称为环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification),由 Notomi 等人于 2000 年提出,是一种高效、灵敏的核酸扩增方法。它通过在恒定温度(60-65 ℃)下实现连续快速扩增,克服了传统 PCR 反应的复杂性与时间,广泛应用于病原微生物检测和传染性疾病诊断。

LAMP 技术的核心是 Bst DNA 聚合酶,其具有链置换活性,能有效解除 DNA 双链间的氢键,进而合成新的 DNA 链,加速扩增过程。与传统 PCR 不同,LAMP 不需要反复的温度控制,提高了操作便捷性与实验效率。

艾科瑞研发的 Bca DNA 聚合酶,基于嗜热细菌 Bacillus Caldotenax,不仅具有 5’→3’ DNA 聚合酶活性,还展现出更强的链置换活性,成为 LAMP 技术的理想酶。通过 LAMP 专用的引物设计软件,能够精准设计出特异性高的 4 或 6 种引物,靶向识别 6 个关键区域,确保扩增过程的特异性与高效性。

LAMP 反应原理复杂而高效。它通过连续的链置换反应,形成一系列交替反向重复靶序列的茎环结构,最终产生复杂的 DNA 片段混合物。该技术的检测方式多样,包括电泳、浊度和染料法,其中染料法的实时检测更为常用。

LAMP 技术的优势在于其高灵敏度与扩增效率,但在实际操作中可能因污染产生假阳性结果。为避免此类问题,操作人员需严格遵循实验室规程,确保实验环境的清洁与无菌。

综上所述,LAMP 技术作为一种前沿的核酸扩增技术,凭借其独特优势,为生物医学研究与临床检测提供了强大的工具。随着技术的不断进步与优化,LAMP 技术的应用前景将更加广阔。

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