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荧光检查的方法 荧光检查

2023-07-19 来源:客趣旅游网

一、荧光检查的适应症及举例

适应症:在皮肤病中适用于细菌、病毒、衣原体、支原体等病原体感染的快速诊断。举例如下:

1、红斑狼疮是一种典型的自身免疫性结缔组织病,多见于15~40岁女性。红斑狼疮是一种疾病谱性疾病,可分为盘状红斑狼疮、亚急性皮肤型红斑狼疮、系统性红斑狼疮、深在性红斑狼疮、新生儿红斑狼疮、药物性红斑狼疮等亚型。荧光检查法可对其进行有效的诊断。

2、疱疹样皮炎是一种较为少见的慢性良性复发性大疱性皮肤病,病因不明。它的特点是反复发作、病程呈慢性经过、皮疹形态多样、对称分布、剧烈瘙痒、预后良好。多发生于22~55岁。常有无症状的谷胶过敏性肠病。荧光检查可对其进行快速的诊断。

3、 在妇科里,荧光检查 是将荧光物质进入生殖系统静脉血中,进行造影。简单地说荧光物质就是造影剂。 荧光检查可以提高妇科检查结果的准确性,有利于及时诊断病症,起到早治疗早康复的效果,更能进行宫颈癌和一些瘤变病症的早期筛查,保护妇女健康。

二、荧光检查的方法

 荧光检查的方法有以下三种:

 1、直接免疫荧光法。用以检查病人的皮肤组织中有无免疫球蛋白或补体沉积,用特异荧光抗体直接滴加于待检的标本上,由荧光标记的抗体与抗原发生特异结合。使之呈现荧光,根据荧光分布和形态确定抗原部位和性质。此法用已知的抗体检查未知的抗原,但一种标记抗体只能查一种抗原,可直接采用病人的病变组织。如:红斑狼疮、疱疹样皮炎、类天疱疮等作冰冻切片,荧光染色。此法简单、特异。

采集标本后,直接涂于载玻片上,自然干燥后,丙酮固定10分钟,待丙酮完全挥发后,加30 l特异性的荧光素标记的抗体,室温湿盒内孵育30min,使标记的抗体与抗原发生特异性结合,取出后 蒸溜水冲洗去未结合的抗体,置荧光显微镜下观察。

2、间接免疫荧光法。用以检测病人血清中是否存在某种特异抗体或自身抗体,反应中的两对抗原抗体相对应的特异结合,而第二抗体(荧光抗体)则针对第一抗体的结合体,由于第一抗原分子可与若干个抗体分子结合,因而第二结合反应后,灵敏度大大提高。本法常用于各种自身抗体的检测。如:系统性红斑狼疮、硬皮病等。

标本采后,保存于转送培养基中,临用前混匀后取悬液涂片,固定后加入50 l用PH 7.2 PBS 1:16稀释的特异性抗体,35℃孵育30分钟,取出后用PH 9.0的0.01 M的磷酸盐缓冲液浸泡10分钟,干燥后用50 l 1:500稀释的荧光抗体(第二抗体),35℃孵育30min,蒸溜水冲洗,干燥后甘油封固加盖玻片镜下观察。

3、补体结合法本法。是在间接法的基础上发展而成的,即在抗原抗体反应时,加入补体,再用荧光标记的抗补体抗体进行示踪。如:检测妊娠疱疹病人的自身抗体。

三、荧光检查法的使用器械

医用荧光棒是一种化学发光的照明光源,把医用荧光棒贴在阴道扩张器叶片内侧,作为进行阴荧光视诊的照明光源,用于妇科常规检查、宫颈癌及癌前病变的筛查,本产品为一次性使用产品,不与人体接触,无毒、无放射性。其注意事项如下:

1、医用荧光棒被折断并活化后的几分钟内,荧光光源最为明亮,如果荧光视诊未在15分钟最佳观察时间内完成,则需更换荧光检查棒;

2、用医用荧光检查棒检查有无出现醋酸白病变区,可重复用3-5%醋酸溶液涂抹于宫颈,以便帮助从黏液中区分醋酸白病变区域

3、有时荧光光源发出的光会发生宫颈反光,轻轻移动扩阴器,白色区域如果出现移动,那么就是荧光光源造成的反射光,或者用一个小棉球轻压醋酸白病变区,用这种方法改变宫颈的轮廓,这样可以帮助区别是荧光光源还是真正的醋酸白病变;

4、化学荧光视诊不用于醋酸白病变的分级;

5、医用荧光检查棒中的液体不可食用,且具有一定黏附性,出现漏液,请勿使用,并清洗双手;严禁弄破医用荧光棒,以免棒内液体泄漏。

6、医用荧光棒不污染衣物,可放心使用。

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