内蒙古医学杂志Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｍｅｄ Ｊ ２０１１年第４３卷第８期 ９３７ 因的耐受性好［３］，通过罗哌卡因硬膜外阻滞缓解了 综上所述，罗哌卡因硬膜外阻滞进行无痛分娩 产妇紧张情绪，进而有效地防止不协调性子宫收缩， 效果确切，对母婴均有较高的安全性，可降低剖宫产 子宫收缩维持正常的极性和节律性，从而促进产程 率，为一种理想的无痛分娩方式。 进展；另外产妇盆底肌肉松弛，胎头在下降及内旋转 的过程中需要克服的阻力减小，且宫颈松弛、宫口扩 ［参考文献］ 张加速，更进一步促进胎头下降，而胎头下降引起的 ［１］郎秋英．妇产科分娩镇痛对产妇及新生儿的影响［Ｊ］．中国妇 神经体液反射使垂体释放更多的缩宫素，加速分娩 幼保健，２００７，１４（２２）：１ ８８５． 进展，缩短整个产程 Ｊ。 ［２］刘玉秋，王野，张玉秋。等．全产程硬膜外分娩镇痛对母婴的影 响［Ｊ］．现代妇产科进展，２０１０，１９（９）：７１６—７１７． 对分娩结局的影响。无痛分娩对剖宫产率的影 ［３］ Ｍａｔｔｉｎｇｌｙ ＪＥ，Ｄ’Ａ］ｅｓｓｉｏ Ｊ．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｏｂｓｔｅｔｒｉｃ ａｎａｌｇｅｓｉｃｓ ａｎｄ 响尚有争议。毛辉、李春梅通过对３Ｏ例初产妇进行 ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ ｏｎ ｔｈｅ ｎｅｏｎａｔｅ：ａ ｒｅｖｉｅｗｌ［Ｊ］．Ｐａｅｄｉａｔｒ Ｄｒｕｇｓ，２００３，５ 全产程分娩镇痛，发现无痛分娩对分娩过程中中转 （９）：６１５． 剖宫产率无影响 Ｊ。本研究中，无痛分娩组中转剖 ［４］Ｓｉａ ＡＴ，Ｃｈｏｎｇ ＴＬ．Ｅｐｉｄｕｒａｌ ０．２％ｒｏｐｉｖａｃａｉｎｅ ｆｏｒ ｌａｂｏｕｒ ａｎａｌｇｅ— 宫产率为８．７％，明显低于对照组（２８．８％）。剖宫 ｓｉａ：ｐａｒｔｕｒｉｅｎｔ—ｃｏｎｔｒｏＵｅｄ ｏｒ ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｉｎｆｕｓｉｏｎ［Ｊ］Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉａ ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ，１９９９，２７：１５４—１５８． 产率降低的原因主要考虑为大多数产妇对自然分娩 ［５］毛辉，李春梅．全产程分娩镇痛对分娩过程及结局的影响［Ｊ］． 中的宫缩痛有更多的恐惧和焦虑，罗哌卡因硬膜外 中国医药科学，２０１１，１（２）：８７—８８． 阻滞进行无痛分娩在一定程度上可使产妇解除分娩 必痛的传统观念，在精神和躯体上为产妇增加了经 ［收稿日期］２０１１—０５—１０ 阴道分娩的信心。 ［作者简介］郭志利（１９７０一），女，内蒙古包头市人。医学 学士．副主任医师。 白蛋白钴结合力法检测缺血修饰 白蛋白的建立与评价 吴春华，莫殿军 （赤峰学院附属医院检验科，内蒙古赤峰０２４０００） ［摘要］目的：建立缺血修饰白蛋白（ｉｓｃｈｅｍｉａ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ａｌｂｕｍｉｎ，ＩＭＡ）的检测方法并对其性能进行评价。 方法：应用长沙颐康科技开发有限公司生产的ＩＭＡ试剂盒和日立７６００全自动生化分析仪组建白蛋白钻结 合力（ａｌｂｕｍｉｎ ｃｏｂａｌｔ ｂｉｎｄｉｎｇ，ＡＣＢ）比色分析法检测ＩＭＡ的分析系统，依据美国临床实验室标准化委员会 （ＮＣＣＬＳ）ＥＰ文件的要求，对该分析系统的线性、回收率、精密度分别做出评价。结果：不同浓度白蛋白与 ＡＣＢ比色分析法检测结果是线性的，回归方程为Ｙ＝１．６７６Ｘ＋６．７３５（ｒ＝０．９８３，Ｐ＝０．００１）；平均回收率为 ９７％；以该分析系统测定低、中、高３种不同水平ＩＭＡ的重复精密度（ｃｖ）分别为３．３４％、１．１３％、１．６７％，中 间精密度（ｃｖ）分别为３．７２％、１．６３％、１．８８％。结论：ＡＣＢ比色分析法测定ＩＭＡ，实验条件的建立较为简 单，各项检测指标均能够满足临床实验室管理办法的相关要求，标本和试剂用量少，方便快捷，亦可以进行大 量样本的测定。适宜临床常规推广应用。 ［关键词］缺血修饰白蛋白；白蛋白钻结合力；急性冠状动脉综合征 ［中图分类号］Ｒ４４６．１１３［文献标识码］Ａ［论文编号］１００４—０９５１（２０１１）０８．０９３７ ０３ 近年来研究发现，缺血修饰白蛋白（ＩＭＡ）是美 缺血生化检测标志物［ 。传统的心肌损伤标志物 国食品药品管理局（Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ， 均是在心肌坏死４～６ ｈ血中浓度才升高，而ＩＭＡ ＦＤＡ）批准的，具备理想心肌标志物特征的早期心肌 在心肌缺血发作后５～１０ ｍｉｎ血中浓度就开始升 ［通讯作者］莫殿军（１９７３ ），男，内蒙古赤峰市人。医学硕士，主管检验师。 ９３８ 高 Ｊ，缺血停止后能持续２～４ ｈ．１２ ｈ后可恢复正 常，具有敏感、特异、早期、稳定、快速、经济、容易分 析等特点，可以在急性冠状动脉综合征（ａｃｕｔｅ ｃｏｒｏ— ｎａｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ，ＡＣＳ）早期可逆阶段时检出，是更为 理想的早期心肌缺血生化检测标志物［３－－９ Ｊ，为临床 早期诊断心肌损伤和排除诊断ＡＣＳ及其危险程度 的分级提供科学的依据。本研究采用国产的试剂盒 和全自动生化分析仪组建白蛋白钴结合力（ＡＣＢ）比 色分析法检测ＩＭＡ的分析系统，并对其性能进行评 价，从而为最终将ＡＣＢ比色分析法检测ＩＭＡ发展 成为临床常规诊断实验奠定基础。 １材料与方法 １．１仪器 日立７６００全自动生化分析仪，日本日立公司提 供。参数设置依据长沙颐康科技开发有限公司 ＩＭＡ试剂盒参数表，详见表１。 表１液体双试剂ＩＭＡ上机参数表 仪器ＨＩＴＡＣＨＩ ７６００ 检测方法 测光点 次波长／主波长 样品量 Ｒ１试剂量 Ｒ３试剂量 １．２试剂 ＩＭＡ试剂盒（批号：０９０８２４７３１）、质控品（批号： ２００９１１２５）、标准液（批号：２００９１１２５），均为长沙颐康 科技开发有限公司提供。试剂组成：Ｒ１：稳定剂、 Ｃｏ 等组成；Ｒ２：稳定剂、有机显色物ＤＴＴ等组成。 标准品的浓度为６１．８ ｕ／ｍｌ。 １．３ ＡＣＢ比色分析法的检测原理 血清中正常人的血清白蛋白（ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｌｕｂｕｍｉｎ．ＨＳＡ）是以活性形式存在的。当加入氯化 钴后，Ｃｏ 与具有正常结合能力的ＨＳＡ的Ｎ一末端 结合，致使溶液中游离的Ｃｏ 浓度降低，而心肌缺 血患者的ＨＳＡ转化成了ＩＭＡ，处于修饰状态，此 时，ＩＭＡ与外源性 结合能力就会大大地下降， 当向血清中加入同样浓度的氯化钴后，当Ｃｏ 与正 常的ＨＳＡ充分结合以后，溶液中仍会有大量的游离 ，没有结合的Ｃｏ０ 就会与接下来加入的二巯苏 糖醇（１，４一ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ，ＤＴＴ）发生反应显色，显 色愈强，表明没结合的Ｃｏ 就越多，ＩＭＡ浓度也就 内蒙古医学杂志Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｆｉａ Ｍｅｄ Ｊ ２０１１年第４３卷第８期 越高，即ＩＭＡ水平与反应显色的强度是呈正相关 的，我们用分光光度法检测它的吸光度，就可以推算 出血清中ＩＭＡ的浓度。该试剂盒，就是利用剩余的 ＣｏＺ 与ＤＴＴ反应生成红褐色的产物，在波长５１０ ａｍ下比色，其吸光度与Ｃｏ 浓度成正比，同标准品 比较即可得出ＡＣＢ的浓度，即白蛋白与钴离子的结 合能力，结合能力与ＩＭＡ水平是成反比的。也就是 说，ＡＣＢ的值越小，ＩＭＡ水平就越高。 １．４单位（ｕ／ｍ１）定义 每毫升血清中的白蛋白结合１ ｇ Ｃｏ 为１个 单位。 １．５计算方法 一咖 驯 ∞ 蝴 标本ＡＣＢ浓度（ｕ／ｍ１）：（△Ａ空白一△Ａ样品）／ （△Ａ空白一△Ａ标准）×校准浓度。 注：ＡＡ＝Ａｚ—Ａ１，Ａ１为加入试剂Ｒ１混匀后测 定的吸光度，Ａ２为加入试剂Ｒ２混后匀测定的吸光 度，标准浓度即标准品的浓度。 １．６ ＡＣＢ比色分析法检测ＩＭＡ分析系统性能评 价指标及方法 １．６．１线性评价 将白蛋白浓度为４３．１ ｇ／Ｌ的复合校准血清（上 海复兴长征医学科学有限公司提供，批号５３７ＵＮ） 进行原倍、１：２、１：３、１：４、１：８倍稀释，每一份标本平 行检测２次，检测值与其相对应的浓度做直线回归 分析。 １．６．２回收率评价 用生理盐水将标准品做１：１０、１：５和１：２倍稀 释，每一浓度检测５次后取平均值计算回收率。 １．６．３精密度评价 依据美国ＮＣＣＬＳ评价方案的要求，取低、中、 高三份不同水平的ＩＭＡ标本，平行检测２Ｏ次，分别 计算３种浓度的重复精密度（ｃｖ）；将以上标本分 装２０份，置于一２０＂Ｃ以下冰箱保存，每天取２份，彻 底融化混匀后，每份测定１次，共测定２次（两次测 定间隔大于２小时），连续检测１０ ｄ，最后分别计算 ３种浓度的中间精密度（ｃｖ）。 １．７统计学分析 数据统计和存储应用ＳＰＳＳ１７．０软件，计量资 料用孟±Ｓ表示，白蛋白浓度与ＡＣＢ比色分析法测 定值的相关性分析做曲线拟合（Ｃｕｒｖｅ Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ）， 回归方程应用线性回归分析。 ２结果 ２．１线性评价 不同浓度自蛋白与ＡＣＢ比色分析法检测结果 是线性的，其回归方程为：Ｙ＝１．６７６Ｘ＋６．７３５（ｒ＝ 内蒙古医学杂志ＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａＭｅｄ Ｊ ２０１１年第４３卷第８期 ０．９８３，Ｐ＝０．００１），详见附图。 ¨ 删 附图 不同浓度白蛋白与Ａ（１Ｂ法检测值的相关 曲线 图版编号：１００４—０９５１一（２０１１）０８—０９３９一Ｆ１ ２．２回收率评价 以ＡＣＢ比色分析法检测做１：１０、１：５和１：２倍 稀释后的标准品，回收率分别为：９４％、９６％、１０１％， 平均回收率为９７％。 ２．３精密度评价 ＡＣＢ比色分析法测定ＩＭＡ的精密度详见表２。 表２ ＣＢ比色分析法测定ＩＭＡ的 精密度（ＣＶ％） 标本 测定次数 孟±ｓ ｃｖ（％） 重复精密度 低浓度 ２０ ３４．４±１．１５ ３．３４ 中浓度 ２Ｏ ５９．４±０．６７ １．１３ 高浓度 ２Ｏ ８９．９±１．５０ １．６７ 中间精密度 低浓度 ２Ｏ ３４．１±１．２７ ３．７２ 中浓度 ２０ ６Ｏ．０±０．９８ １．６３ 高浓度 ２Ｏ ９０．３±１．７０ １．８８ ３讨论 缺血修饰白蛋白（ｍ ）同传统的心肌损伤标志物 不同，它 缺血发作５～１０ ａｒｉｎ后血液中浓度就会 升高［２］，此时未发生心肌细胞的不可逆性损伤，所以， ＭＡ检测更具早期诊断的价值，能够辅助临床医生尽 早明确心肌缺血．的诊断，从而早期进行干预和治疗，进 而改善病人的预后、减少死亡率、节省医疗资源。目 前，ＩＭＡ的测定方法多数采用ＡＣＢ比色分析法，该检 测方法简便、快速、经济，３Ｏ ｍｉｎ左右就可获得结果，能 够满足Ｉ 宋急诊检验的要求。 本研究采用国产试剂盒和全自动生化分析仪组 建的ＡＣＢ比色分析法检测血清ＩＭＡ分析系统，其 线Ｉ生、回收率、精密度均能满足临床实验室管理办法 的相关要求，测定结果的准确性、重复性能够得到保 ９３９ 证，并且实验条件的建立较为简单，标本和试剂用量 少，方便快捷，亦可以进行大量样本的测定，适宜临 床常规推广应用。 鉴于ＩＭＡ检测还未能在临床上大规模地应用， 有关试剂盒的性能及其临床应用情况的研究资料还 很匮乏，仍需我们临床检验工作者不断地去研究积 累。同时ＩＭＡ的检测尚缺乏统一的检测阈值和生 物学参考区间［１０Ｉ ｎ］，实验室大多是根据自己的受试 者工作曲线自行确定的，能否使其统一化、规范化还 有待于进一步的研究。 ［参考文献］ ［１］ＲｏｙＤ，Ｑｕｉｌｅｓ Ｊ，ＳｉｎｈａＭ，ｅｔａ１．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｒ日ｄｉ０ｆ ｅｑｌ】ｅＤｃｙ ｃａｔｈｅｔｅｒ ａｂｌｔｉｏｎ ｏｎｔｈｅｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｍａｒｋｅｒｉｓｃｈ￣ｎｉａｍｏｄｉｉｆｅｄ￣ｂｕｍｍ［Ｊ］． Ａｍ Ｊ Ｃａｒｄｉｏｌ，２００４，９４（４）：２３４—２３６． ［２］Ｗｏｒｓｔｅｒ Ｄｅｖｅｒ＿ｏ￣ａｕｘ ＰＪ，Ｈｅｅｌｓ—Ａｎｓｄｅｌｌ Ｄ，ｅｔ １ａ．Ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｍｏｄｉｆｉｅｄａｌｂｕｍｉｍｔＯｐｒｅｄｉｃｔ ｓｅｒｉｏｕｓ ｃａｒｄｉａｃｏｕｔｃｏｍｅｓｉｎ ｔｈｅ ｓｈｏｒｔｔｅｒｍ ａｍｏｎｇ ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｃｕｔｅ ｃｏｌｘ）：ｎａｒｙ ｓｙｎ— ｄｍｍｅ［Ｊ］．ＣａｎＭｅｄＡｓｓｏｅ Ｊ，２００５，１７２：１ ６８５—１ ６９０． ［３］ＷｕＡＨＢ．Ｔｈｅｉｓｃｈｅｍｉａ—ｍｏｄｉｆｉｅｄ ａｌｂｕｍｉｎｂｉｏｍａｒｋｅｒｆｏｒｍｙｏａｃｒ— ｄｉｌａ 蛐 ａ［Ｊ］．ＭｅｄＬａｂＯｂｓ，２００３，３５（６）：３６—４０． ［４］ Ｓａｃｃｈｅｔｔｉ Ａ．“Ｉｓｃｈｅｍｉａ ｍｏｄｉｉｆｅｄ ａｌｂｕｍｉｎ”：ａ Ｆｌｅｗ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｍａｒｋｅｒｏｆｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈ￣ｎｉａ［Ｊ］．ＥｍｅｒｇＭｅｄ Ｊ’２００４，２１（１）：３ —４． ［５］ＳｉｎｈａＭＫ，ＲｏｙＤ，ＧａｚｅＩＸ：，ｅｔａ１．Ｒｏｌｅ ｏｆ“Ｉｓｃｈｅｍｉａｍｏｄｉｆｉｅｄ ａｌ— ｂｕｍｉｎ＇’，ａ ｎｅｗ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｍａｒｋｅｒ ｏｆｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈ￣ｏｄａ，ｉｎｔｈｅ ｅａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｃｏｒｏｎａｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ［Ｊ］．Ｅｍｅｒｇ Ｍｅｄ Ｊ， ２００４，２１（１）：２９—３４． ［６］Ｂａｒ—Ｏｒ Ｄ’ｗｊｎ】＝ｄｅｒ ＪＶ，Ｖａｎｂｅｎｔｈｕｙｓｅｎ Ｋ，ｅｔ １ａ．Ｒｅｄｕｃｅｄ ｌａｂｕ— ｍｉｌｌ—ｃｏｂａｌｔ ｂ．ｍｄｉＩ城ｗｉｈｔｔｒａｎｓｉｅｎｔｍｙｏｃａｒｄｉａｌｉｓｃｈｅｍｉａ ａｆｔｅｒｄｅｃ— ｉｆｖｅ ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌ ｃｏｒｏｎａｒ￣ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ：ａ ｐｒｅｌｊ１Ｉｌｉｎａｒｙ ｃ０删捌 ∞ｔｏ ｃｒｅａｔｉｎｅ ｋ￣ｎａｓｅ一Ⅷ，ｍｙｏｇｌｏｂｍ，ａｎｄ ｔｒｏｐ￣ｌ Ｉ ［Ｊ］．ＡｍＨｅａｒｔ Ｊ，２００１，１４１（６）：９８５—９９１． ［７］ＣｈｒｉｓｔｅｎｓｏｎＲＨ，ＤｕｈＳＨ，Ｓａｎｌ￣ＷＲ，ｅｔａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ Ｄｆ ａｌｌ Ａｌｂｕｍｉｎ Ｃｏｂａｌｔ商Ｉ１（１ｉＩｌｇ Ｔｅｓｔ ｆｏｒ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ０ｆ ａｃｕｔｅ ｃｏｒｏｎａｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ：ａ ｍｕｌｉｔｃｎｅｔｅｒ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ Ｃｈ￣－ｏ＿，２００１，４７ （３）：４６４—４７０． ［８］ＷｕＡＨ’ＭｏｍｓＤ ＦｌｅｔｃｈｅｒＤＲ，ｅｔａ１．Ａｎａｌｙｓｉｓ ０ｆｔｈｅＡｌｂｕｍｉｎ ＣｏｂａｌｔＢｉｎｇｄｉｎｇ（ＡＣＢ）ｔｅｓｔ ａｓ ａｌｌ ａｄｊｔａｒｃｔ ｔｏ ｃａｒｄｉａｃ ｔｒｏｐｏ￣ｎ Ｉ ｆ０ｒ ｈｔｅ ｅａｒｌｙ ｄｅｔｅｃｉｔｏｎ ｏｆ ａｃｕｔｅｍｙｏｃａｒｉｄｌａｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ［Ｊ］． ａｓｃ Ｔｏｘｉｏｃｌ，２００１，１（２）：１４７～１５１． ［９］Ｂａｒ—ＯｒＤ，ＬａｕＥ， ｎｌｄｅｒ Ｊ、，．Ａｎｏｖｅｌ ａｓｓａｙｆｏｒ ｃｏｂａｌｔ—ａｌｂｕｍｉｎ ｂ￣ｎｄｉｎｇ ａｎｄｉｔｓ ｐｏｔｅｎｔ￣８Ｓ ａ ｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｉｓｅｈｅｍｉａ—ａ ｐｒｄｉｍｉ￣ｒｅｐｏｒｔ［Ｊ］．ＥｍｅｒｇＭｅｄ Ｊ，２０００，１９（４）：３１１—３１５． ［１０］莫殿军．蒙古族地区健康人群缺血修饰白蛋白的参考范围［Ｊ］． 中国医药指南，２０１０，（３５）：８—１０． ［１１］崔丽艳，李晶，张捷，等．北京地区汉族人群缺血修饰自蛋白 考范围的建立［Ｊ］．中国误诊学杂志，２００８，８（２６）：６ ３０１ ６ ３０３． ［收稿日期】２０１１—０４—２８ ［作者简介］吴春华（１９６７一），女， 蒙古赤峰市人。主管 检验师。