２０１２年５月第３４卷第ｌ０期Ｈｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１２，Ｖｏｌ ３４ ＭａＥＮｏ，１０ １５３５ 屑及菌斑在牙面窝沟内堆积，从而预防龋病的发生，窝沟封闭 作为预防年轻恒牙窝沟龋的一种有效的方法被广泛接受 。 面还可以快速无疼的完成沟内的清洁预备，简便易操作，容易 被患儿所接受，同时又能减少不必要健康牙体组织的丢失。通 通过窝沟封闭大约可减少龋病６０％一９９％ 。其作用主要是 通过封闭剂在牙面窝沟表面的紧密粘附，从而隔绝致龋因素而 过此临床观察，封闭剂的脱落率降低到现在的３．４％，窝沟龋的 发生率为１．３％。 实现。牙面酸蚀可使牙釉质表层脱钙形成无数微孔，窝沟封闭 剂可进入这些微孑Ｌ，形成树脂突，产生机械嵌合作用，使封闭剂 在牙面粘附更牢固。但在酸蚀前必须有效清洁牙面上的菌斑 综上所述，窝沟封闭的关键是提高封闭剂的保留率，封闭 剂的保留率受材料的性能及牙面处理技术的影响 ，牙面处理 技术是封闭剂是否保留长久的关键，本研究采用超声洁牙机清 和食物残屑。以往在临床工作中实施窝沟封闭是采用牙刷蘸 清洁剂清洁牙面，而对这样窄而深的窝沟不能进行彻底的清 洁，致使酸蚀剂不能充分与釉质接触；使酸蚀效果降低；同时还 影响封闭剂向沟内渗透，从而减小了封闭剂的有效粘附面积和 洁六龄齿牙面的窝沟、点隙，增强了封闭剂的固位，减少微渗漏 的产生，可进一步提高封闭剂的保留率，更有效的预防窝沟龋 的发生。 参考文献 １卞金有，胡德渝主编．预防口腔医学．第４版．北京：人民卫生出版 社，２００３．７９． ２朱烈昭主编．儿童口腔病防治．第１版．成都：四川科学技术出版社， １９９１．２９３． 渗透度，致使窝沟封闭剂脱落，而本研究采用的超声洁牙机清 洁牙面的窝沟、点隙，更能有效地清除点隙、裂沟口的有机塞、 再生釉质上皮、食物残渣、甚至菌斑组成的阻挡，让沟裂点隙牙 面充分暴露，使酸蚀剂与暴露的牙面充分接触，同时扩大了窝 ３曾晓莉，石四箴．窝沟封闭技术研究进展．上海医学，２００５，２８：２５５－ ２５７． 沟的开口，去除釉质的表面高度矿化的无釉柱结构的表层，使 新鲜的牙釉质表面产生微孔结构，增大与树脂的粘附面积，有 利于粘度低，流动性好的封闭剂充分渗入到釉柱间，形成树脂 突，与釉质锁结起来。有学者通过电镜比较机械性磨除釉质表 ４刘大维主编．口腔预防医学．第１版．北京：人民卫生出版社，１９８７． ７９． ５张光东，于金华，俞未一，等．窝沟釉质成形封闭术封闭剂的扫描电 镜观察．临床口腔医学杂志，１９９９。１５：６３． ６ Ｗｉｌｌｉａｍｓ Ｂ．Ｌａｘｔｏｎｌ Ｈ．ｆｉｓｓｕｒｅ ｓｅａｌａｎｔｓ：ａ ４２ ｙｅａｒ ｅｌｌｎｉｅａｌ ｔｒｉｌ ｃｏｍｐａｒｉａｎｇ 层与毛刷刷洗釉质表层封闭剂树脂突，发现前者较后者的树脂 突长且粗大密集，从而增强了封闭剂树脂与牙釉面的机械嵌合 ａｌｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｌ ａｓ ｐｏｌａｙａｌｋｅｎｏａｔｅ ｃｅｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｂｉｓ ｇｌｙｃｉｄｙｌ ｍｅｔｈａｅｒｙ・ ｌａｔｅ ｒｅｓｉｎ ｕｓｅｄ ａｓ ｆｉｓｓｕｒｅ ｓｅａｌａｎｔｓ．Ｂｒ Ｄｅｎｔ Ｊ。１９９６，１８０：１０４・１０８． 作用，有利于封闭剂粘附固位 Ｊ。防止细菌及代谢产物侵袭釉 质。促进了封闭材料与牙齿表面的结合。超声洁牙机清洁牙 （收稿日期：２０１１—０９—２７） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－７３８６．２０１２．１０．０５５ ・临床研究・ 食管癌中人乳头状瘤病毒感染和Ｐ５３的关系 张云虹 【关键词】 食管癌；人乳头状瘤病毒；／＇５３ 【中图分类号】 Ｒ ７３５．１ 【文献标识码】 Ａ 【文章编号】 １００２—７３８６（２０１２）１０—１５３５—０２ 鳞状细胞癌，其中有１７例发生淋巴结转移。 人乳头状瘤病毒（ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｍｓ，ＨＰＶ）是一种高度 特异性的嗜上皮性病毒，属双链闭环的小ＤＮＡ病毒，它由蛋白 衣壳这层外衣和被包裹着的核心构成。我国是食管癌高发区， 食管癌居我国癌症死因的第四位，食管癌的发生发展和许多因 素有关系，近年来ＨＰＶ感染和食管癌的发生之间关系的研究 越来越受到重视。本文通过免疫组化ｓＰ法检测ＨＰＶ和Ｐ５３ １．２主要试剂（１）鼠抗人人乳头状瘤病毒（广谱）单克隆抗 体，克隆号ＢＰＶ一１／１ Ｈ８＋ＣＡＭＶＩＲ，由上海太阳生物技术有限公 司提供；（２）鼠抗人Ｐ５３蛋白免疫组化单克隆抗体，克隆号ＤＯ． ７，由福州迈新生物有限公司提供。 １．３免疫组化实验主要步骤：（１）石蜡切片常规脱蜡、水化； 在６０例食管癌及其癌旁组织中的表达情况，来探讨ＨＰＶ感染 在食管癌和癌旁组织中的不同及与Ｐ５３表达的相关性。 １材料与方法 （２）柠檬酸盐抗原修复液高温修复；（３）滴加过氧化物酶阻断 剂；（４）滴加正常非免疫动物血清；（５）滴加第一抗体；（６）滴加 生物素标记的第二抗体；（７）滴加链霉菌抗生物素蛋白．过氧化 物酶试剂；（８）ＤＡＢ显色剂显色，苏木素复染，中性树胶封固。 免疫组化均设有阳性对照（图１），结果判读采用双盲法，由两 位中级以上职称的病理医师阅片。 １．４结果判断断为阴性。 １．１标本来源选择２００９年９月至２０１１年９月河北省衡水 市第二人民医院病理科存档食管癌石蜡标本６０例，常规４％中 性甲醛固定，石蜡包埋，４ ｍ切片，采用福州迈新生物有限公 司的金・多聚赖氨酸粘附玻片行免疫组化。６０例食管癌均为 作者单位：０５３０００河北省衡水市第二人民医院病理科 ＨＰＶ和Ｐ５３阳性者细胞核内有棕黄色颗粒沉 着，胞质胞核同时着色，仅胞质着色或胞质、胞核均不着色则判 ｌ５３６ 医药 ９Ｉ２年５月笫３４卷第１Ｏ期Ｈｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ ＪｏｕｍａＩ．２０１２．ｖ０Ｉ ３４ Ｍａｖ Ｎ０．１０ １．５统计学分析应用ＳＰＳＳ １３．０统计软件，两样本率比较采 用四格表Ｘ２检验，数据相关性采用Ｓｐｅａｒｍａｎ等级相关进行统 计分析，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 ２结果 ２．１ 食管癌和癌旁正常上皮中ＨＰＶ的感染情况６Ｏ例食管 癌中ＨＰＶ阳性的１２例（２０．Ｏ％），癌旁正常鳞状上皮中ＨＰｖ 阳性的３例（５．０％），食管癌和癌旁正常组织阳性率比较，差异 有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＨＰＶ细胞核呈棕黄色为阳性（图２ ～４）。 ２．２食管癌组织中Ｐ５３的表达与分布Ｐ５３为细胞核着色 （图５），６０例食管癌中有阳性４１例（６８．３％），癌旁正常鳞状上 皮基本上不表达，仅在基底层可出现部分阳性（正常鳞状上皮 基底层亦可部分阳性），癌旁不典型增生的鳞状上皮可呈现阳 性表达（图６）。 图１一一 ＨＰＶ对照（外阴女２１ 图２ ＨＰＶ染色癌组织浸润肌层 岁）（免疫组化×２００） （免疫组化×１００） 图３ ＨＰＶ染色癌组织内见残 一一 图４ ＨＰｖ染色癌细胞核着色 存食管腺（免疫组化× 且见角化珠（免疫组化× １００） ２００） 图５ Ｐ５３染色一一 癌细胞核着色 图６ Ｐ５３染色癌周不典型增生 且见角化珠（免疫组化× 鳞状上皮阳性（免疫组化 ２００） ×１００） ２．３ ＨＰＶ感染和Ｐ５３表达之间的关系 运用Ｓｐｅａｒｍａｎ等级 相关分析，食管癌中ＨＰＶ感染和Ｐ５３表达有一定的相关性（ｒｓ ＝０．５０９７，Ｐ＝０．００００）。见表１。 表１ 食管癌中ＨＰＶ感染与Ｐ５３表达之间的关系 例 ３讨论 ９９％的宫颈癌合并ＨＰＶ感染…。宫颈癌发病的主要病因 就是持续性的高危型的ＨＰＶ感染，ＨＰＶ的Ｅ６、Ｅ７蛋白是病毒 的主要致癌蛋白，它们与细胞的转化和致癌性有密切关系，持 续感染高危型的ＨＰＶ１６／１８以后，Ｅ６、Ｅ７蛋白能改变调控宫颈 上皮的正常周期的信号途径，使细胞周期失控而发生永生 化 。而ＨＰＶ感染与食管癌发生的关系远不如其与宫颈癌关 系那么明确。食管癌的发生与ＨＰＶ感染有关最早是由Ｓｙｒ－ ｊａｌｌｅｎ等 于１９８２年提出来的，随后许多学者也做了相关的研 究，但结论不一。ＨＰＶ的检出率与食管癌的关系因不同的地 区，不同的标本来源以及不同的检测方法而有所差异 Ｊ。本 文应用免疫组化ＳＰ法检测出的食管癌中ＨＰＶ感染的阳性率 为２０．０％。 Ｐ５３蛋白具有特异性的转录调节作用，是细胞生长周期的 负调节因子，它与细胞周期的调控、细胞分化、ＤＮＡ修复及细胞 的凋亡有关。Ｐ５３基因的突变与人类５０．０％的肿瘤发生有关， 它是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因 ］。本文中突变 型Ｐ５３（免疫组化方法只能检测到较稳定的突变型的Ｐ５３蛋 白，野生型的Ｐ５３半衰期短，不易检测）在食管癌中高表达 （６８．３％），而在癌旁正常鳞状上皮基本上不表达，仅在基底层 可出现部分阳性，癌旁不典型增生的鳞状上皮可呈现阳性表 达。该结果说明了突变型Ｐ５３蛋白在食管癌的发生发展中可 能起了很重要的作用。而文中ＨＰＶ和Ｐ５３蛋白的表达呈正相 关，则可能说明了ＨＰＶ通过上调突变型的Ｐ５３而起到了致癌 的作用。 目前，在世界范围内ＨＰＶ与食管癌的关系尚存在一定的 争议，但是不断完善的新的ＨＰＶ检测技术推动了对食管癌病 因学的研究。本文的结果初步显示了ＨＰＶ感染与食管癌的发 生有一定的关系，但最终确定ＨＰＶ和食管癌的关系还需要大 量的研究工作。进一步认识食管癌的发病机制及ＨＰＶ的生物 学特性可以为最终预防和治疗ＨＰＶ引起的食管癌提供强有力 的理论指导。 参考文献 １ Ａｄｅｒｓｓｏｎ Ｓ，Ｒｙｌａｎｄｅｒ Ｅ，Ｌａｒｓｓｏｎ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒ— ＵＳ ｉｎ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２００１，３７：２４６－２５６． ２ Ｔａｌｏｒａ Ｃ，Ｃｉａｌｆｉ Ｓ，Ｓｅｇａｔｔｏ Ｏ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｎｏｔｅｈｌ ｉｎｄｕｃｅｓ ｇｒｏｗｔｈ ａｌＴｒｅｓｔ ｏｆ ＨＰＶ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒ ｃｅＵｓ ｖｉａ ｓｅｐａｒａｔｅ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐ￣ｈｗａｙｓ．Ｅｘｐ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ，２００５，３０５：３４３—３５４． ３ Ｓｙｒｊａｎｅｎ ＫＪ．ＨＰＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐ￣ｈｏｌ，２００２， ５５：７２１－７２８． ４朱林忠，苏秀兰，陈克能，等．人乳头瘤病毒１６在食管癌不同人群中 的检出率．癌症，２００５，２４：８７０—８７３． ５张爱荣．多项肿瘤标志物联合检测对食管的诊断价值．中国基层医 药，２０１１，１８：５４９—５５０． ６金磊，曹勤．人乳头状瘤病毒在食管癌中的表达及其作用．胃肠病 学，２００７，１２：３６—３９． ７杨胜利．杨明，杨劫，等．Ｓｕｒｖｉｖｉｎ与Ｐ５３、Ｒｂ蛋白在我国南北高发区 食管癌组织中的表达及其临床意义．中国现代医学杂志，２００９，１９： ２２５８－２２６０，２２６４． （收稿日期：２０１１—１１—１０）