葡萄糖-6-磷酸脱氢酶试验

【该SOP变动程序】 本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。

【检验的适应证】

可用于G-6－PD缺乏症高发地区对蚕豆病进行普查普防，在高疟地区对需要服抗疟药的对象进行G-6-PD缺乏症的筛选，防止药物性溶血的发生。

【仪器与试剂】

1.仪器：电热恒温水浴箱、离心机 、紫外分光光度计。 2.试剂：

2.1 Tris-HCI-EDTA缓冲液。 2.2 0.1mol/L氯化镁溶液。 2.3 2mmol/LNADP

2.4 6mmol/L葡萄糖－6－磷酸二钠 2.5 6mmol/L－磷酸葡萄糖酸

【操作程序】

6－PGD测定 6－PGD＋G-6-PD测定

加入物 1（U） 2（B） 3(U) 4(B)

Tris-HCL-EDTA缓冲液

0.3 0.3 0.3 0.3

MgCl2溶液 0.3 0.3 0.3 0.3 NADP﹢ 溶液 0.3 0.3 0.3 0.3 溶血液 0.06 0.06 0.06 0.06 蒸馏水 1.74 2.04 1.44 2.04

6－PGA溶液

混匀，置37℃水浴10分钟

0.3 0.3

G6P溶液 0.3

根据每升血液每分钟催化反应产生1umol的NADPH为1个国际单位，换算成每克血红蛋白的酶活力。先分别求6－PGD及（6－PGD+G-6-PD）的活力，再求G-6-PD的活力。 8040 酶活力（U/gHb）=△Amin×—— Hb(g/L)

G-6-PD活力＝（6－PGD+G-6-PD）-6-PGD

【参考值范围及报告单】

G-6-PD活力（已校正6－PGD）=8.34±1.59U/ gHb(37℃) G-6-PD活力（未校正6－PGD）=12.1±2.09 U/ gHb(37℃)

【葡萄糖－6－磷酸脱氢酶测定的注意事项】

1. 溶血液制备：取新鲜抗凝血离心去上清及白细胞层，用生理盐水洗涤两次，再加盐水使压积红细胞约为30％，将此红细胞悬液置冰水备用。用时以蒸馏水作25倍稀释即为溶血液。用氰化血红蛋白法测定溶血液中血红蛋白的浓度。

2. 如6次读数相差大，应增加比读次数，直至连续5min各min间读数接近为止。

操作人员 部门主管 质量负责人

姓名 吴芬 ****** ****** 日期 2004年07月15日