2. 自来水冲洗5min （水流要小
3.3%双氧水修复内源性过氧化氢酶 （30%的双氧水1:9配置100ml室温30min 注意避光；
4. 单蒸水洗5min*2次,PBS缓冲液洗5min*1次
5. 热修复抗原，将切片浸入0.01M的枸橼酸盐缓冲液中，微波炉处理高火5min , 低火20min，然后自然冷却；
6. 取出切片放入染色缸中,PBS缓冲液洗5min*1次
7. 取出切片放入湿盒中 滴加5%BSA封闭液（以盖满组织为宜，室温30min 8. 甩去封闭液滴加一抗（盖满组织为宜 阴性对照滴加等量PBS缓冲液,最后放 入37C烘箱中2h
9. 放入染色缸中，PBS缓冲液洗5min*3次
10. 却出切片放入湿盒滴加二抗（覆盖满组织为宜室温30min 11. 取出放染色缸中，PBS缓冲液洗5min*3次
12. 再放入湿盒中加SABC （覆盖满组织为宜室温30min 13. 取出放入染色缸中,PBS缓冲液洗5min*3次
14. DAB显色；（取粉状DAB 0.02g充分溶于100ml单蒸水中后加100卩双氧水 混匀，倒入染色缸中显色14-15min，镜下控制显色时间
15. 中止显色用单蒸水洗 5min*2次自来水洗5min
16. 苏木素复染2min，后自来水冲洗2min，然后盐酸分化5s最后自来水冲洗 10mi n
17.9-16号酒精各2min，18最后中性树胶圭寸片
I 8min ,二甲苯U 5min 最后二甲苯
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