《生物技术制药》

一、名词解释

1、人-鼠嵌合抗体：在基因水平上将鼠源单抗的H 和L链可变区基因分离出来，分别与人Ig的H 和L链的稳定区（C）基因连接成人-鼠嵌合抗体的H 和L链基因，再共转染骨髓瘤细胞，就能表达完整人-鼠嵌合抗体2、生物技术制药：采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物，从而达到预防，治疗和诊断疾病的一种新型生物制药技术。

3、亚单位疫苗：是指不含病原体核酸，选用能诱发宿主产生中和抗体的微生物蛋白（提取或合成细菌、病毒外壳的特殊蛋白结构）或表面抗原，即抗原决定簇制成的疫苗，这类疫苗不是完整的病毒，是病毒的一部分物质，故称亚单位疫苗。

4、蛋白质药物化学修饰：在分子水平上对蛋白质药物进行化学改造，通过对主链的切割、剪接及化学基团的引入，实现对蛋白质药物理化性质和生物活性的改变，属蛋白质改性范畴。

5、固定化酶：是将具有一定生理功能的酶或生物细胞，用物理或者化学方法将其固定，作为固体生物催化剂而加以利用的一种技术。二、单项选择题

1、现代生物技术的标志是：A

A、DNA互补双螺旋结构模型的提出B、DNA测序技术的诞生

C、第一只克隆羊“多莉”的诞生D、人类基因组草图的完成

2、获得目的基因最常用的方法是：B

A、化学合成法 B、PCR技术C、逆转录法 D、DNA探针技术3、所谓“第二代基因工程”是指A

A、蛋白质工程 B、细胞工程 C、酶工程 D、抗体工程4、酶和细胞固定化最常用、最有效的方法是：C

A、载体结合法 B、交联法

C、包埋法 D、选择性热变性法

5、真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式表达，下列错误的是：D A、基因操作简便 B、只能作抗原用

C、容易实现高效表达 D、易被细菌酶类水解6、目前应用最广泛的产酶菌是：A

A、大肠杆菌 B、枯草杆菌 C、青霉菌 D、链霉菌7、大肠杆菌的基因表达系统为A

A、pBV220/pET B、YEp/YRpC、pUC/λgt11 D、pBR322/λgt108、用于生产α-干扰素的动物细胞是A

A、Namalum B、Vero C、WI-38 D、MIRC-5

9、外源基因在动物细胞与大肠杆菌中表达产物的主要区别是A A、糖基化 B、产量高 C、性质稳定 D、疗效可靠10、基因表达最常用的宿主菌是A

A、大肠杆菌 B、枯草芽孢杆菌 C、链霉菌 D、酵母11、筛选杂交瘤细胞（脾-瘤融合细胞）选用的培养基是B A、HT B、HAT C、RMP1640 D、BME12、采用凝胶过滤法分离单克隆抗体，最高峰属于B A、IgG B、IgM C、IgA D、IgE13、改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是C

A、降低相对分子量 B、增加组织通透性 C、降低免疫源性 D、延长半衰期

14、鼠源性单克隆抗体改造后得到小分子抗体，常用的是B

A、单域抗体 B、单链抗体

C、Fab片段抗体 D、最小识别单位15、酶的主要来源是C

A、生物体中分离纯化 B、化学合成

C、微生物生产 D、动/植物细胞与组织培养三、配对选择题题 [ 1—4 ]

A、基因工程 B、细胞工程 C、酶工程D、发酵工程 E、生化工程1、生物技术的核心与关键是A2、生物技术的基础是B3、生物技术的条件是C

4、生物技术获得最终产物的手段是D

题 [ 5—8 ] 菌种选育方式与所得到的菌种类型 A、自然选育 B、定向培育 C、诱变育种 5、抗性菌株B 6、野生型菌株A 7、突变株C

8、营养缺陷型菌株C四、多项选择题

1、提高基因表达产物稳定性的方法有ABCD

A、组建融合基因产生融合蛋白

B、利用大肠杆菌信号肽将产物转移到胞浆周质中 C、采用位点特异突变方法改变真核蛋白S-S位置 D、采用蛋白酶缺陷型大肠杆菌E、优化基因工程菌培养条件

2、影响外源基因在大肠杆菌中表达效率的因素有ABCD A、启动子的强弱 B、核糖体结合位点的有效性 C、SD序列和起始密码的距离 D、密码子的组成 E、外源基因的拷贝数量

3、蛋白质药物化学修饰后的主要特点是：ABCE

A、循环半衰期延长 B、免疫原性降低或消失 C、毒副作用降低D、理化稳定性降低 E、生物稳定性增强4、菌种的选育方式包括ABCDE

A、自然选育 B、诱变育种 C、杂交育种D、原生质体融合 E、基因重组5、基因载体导入动物细胞常用的方法有BC

A、细胞融合法 B、磷酸钙沉淀法 C、电穿孔法 D、显微注射法 E、重组逆转录病毒介导法五、问答题

1、简述单克隆抗体的制备过程？

答：①抗原与动物免疫：制备特定抗原的单克隆抗体，首先要制备用于免疫的适当抗原，再用抗原进行动物免疫。

②细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养：细胞融合的方法可以采用聚乙二醇诱导融合，选择性的培养基为HAT培养液（次黄嘌呤（H）氨甲喋呤（A）胸腺嘧啶（T）

③刷选阳性克隆与克隆化：可以用免疫酶技术，免疫荧光技术，放射免疫技术等进行阳性克隆。克隆化是指单个细胞通过无性繁殖而获得细胞集团的整个培养过程。

④杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定（杂色体分析）

⑤单克隆抗体的大量制备：可以进行体外或体内培养得到大量的单克隆抗体。

⑥单克隆抗体的纯化

2、简述疫苗与抗体的关系？

答：当机体通过注射或口服等途径接种疫苗后，疫苗中的抗原分子就会发挥免疫原性作用，刺激机体产生高价特异性的免疫保护物质，如特异性抗体，免疫细胞及细胞因子等，党机体再次接触相同病原抗原时，机体的免疫系统便会依循其免疫记忆，迅速制造更多的保护物质

来阻断病原菌的入侵，从而使机体获得针对病原体特异性的免疫力，使其免疫受侵害而得到保护。

3、如何控制基因工程药物的质量？

答：基因工程药物的质量控制主要从蛋白质含量，纯度分析，蛋白质性质测定，生物学效价，杂质的分析等方面着手。

①蛋白质含量的测定②蛋白质纯度检测③蛋白质Mr测定④蛋白质等电点测定⑤蛋白质序列分析⑥内毒素分析，宿主蛋白与核酸残留分析4、论述生物技术制药在人类健康中的作用？答：生物技术制药在人类健康中的积极作用：

①疾病预防，诊断及治疗，生物制药改变了传统制药的原料，工艺和生产方式，制造出由特殊疗效的药物，帮助医学战胜了许多威胁人类健康和生命的顽症，如抗生素药物，其中主要的是基因工程蛋白质药物用于治疗癌症，艾滋病等病症以及用基因工程生产的重组疫苗治疗霍乱，痢疾等。

②利用新型的生物技术制造出的保健品，可以大大提高人类的身体健康素质以及平衡营养结构。

③生物技术药物在农业中（如易于降解的杀从剂）的应用可以改善人类生存的环境，对人类身体健康具有间接重要的作用。

生物技术制药对人类健康可能也存在一些不利的影响，生产某些药物的技术尚不成熟，药物在人体内的药理代谢过程不清楚，对人体存在潜在的危害。

5、蛋白质药物修饰的目的？

答：蛋白质的化学修饰是指在分子水平上对蛋白质药物进行化学改造，通过对主链的切割，剪接及化学基团的引入，实现对蛋白质药物物理化学性质和生物活性的改变，是其循环半衰期延长，免疫原性降低或消失，毒副作用减少，物理化学和生物稳定性增强等，可以扩大蛋白质药物的应用范围。同时可以应用到一下几个方面：①蛋白质纯度鉴定与分析②蛋白质结构与作用机制研究③蛋白质的固定化④蛋白质改性6、生物药物与生物技术药物的含义？

答：生物药物的含义是指运用微生物学，生物学，医学，化学，生物化学，生物技术，药学等科学的原理和方法，从生物体，生物组织，细胞，体液等制造的一类用于预防，治疗和诊断疾病的制品。

生物技术药物的含义是指采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防，治疗和诊断疾病的药物，主要是重组蛋白或核酸类药物，如细胞因子，纤溶酶原激活剂，血浆因子，生长因子，融合蛋白，疫苗，受体，单克隆抗体，反义核酸，小干扰RNA等。