实验组冰淇淋中蛋白质的测定

学生实验报告

卢创仪 10311511121 方健舒 10311511108

姓名:路健能 学号: 10311511122 年级专业: 10食检一班 成绩: 课程名称 食品分析与检验技术 实验名称 冰淇淋中蛋白质的测定 实验目的、要求 1掌握冰淇淋中蛋白质测定的操作技能。 2.掌握冰淇淋中蛋白质测定的意义。 主要设备、器材 伊利冰淇淋、微量凯式定氮装置全套、蛋白质消化仪、硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸、甲基橙指示剂、40g/l硼酸、40%氢氧化钠标准溶液、0.0519967mol/l盐酸标准溶液、烧杯、移液管、酸式滴定管、铁架台。 实验原理 蛋白质是含氮的有机化合物，可将样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定，根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。 实验步骤/记录 一﹑实验步骤 1﹑0.5mol/l盐酸溶液的标定。 2、(1)消化：称取约3.0000g冰淇淋样品，加入0.2g硫酸铜、3g硫酸钾及20ml浓硫酸，置于消化炉中消化约6h，至溶液清澈透明后，再继续消化0.5h。冷却，小心加入20ml水，全部移入100ml容量瓶，用蒸馏水定容至100ml。 (2)、蒸馏吸收：安装好微量凯式定氮装置，在水蒸气发生瓶内装水至其体积的2/3，加3滴甲基红指示剂和3ml浓硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 在接受瓶中加入10ml 40g/L硼酸及2滴混合指示剂，将冷凝管下端插入液面以下；准确吸取样品消化液10mL于反应管内，用约10ml蒸馏水冲洗漏斗，经漏斗迅速加入10mL氢氧化钠溶液，迅速盖紧玻璃塞并水封；加热煮沸水蒸气发生瓶内的水进行蒸馏，指示剂变蓝绿色后继续蒸馏5min，将冷凝管尖端提离液面继续蒸1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端的外部。 (3)、滴定： 将接收瓶内的硼酸液用0.05mol/L盐酸标准溶液滴定至终点（溶液变微红色）。同时做一试剂空白（除不加样品，从消化开始操作完全相同）。 实验结果、分析与讨论 0.5mol/L盐酸标准溶液滴定原始数据记录表 编号 基准无水碳酸钠质量m,g 样品消耗盐酸标准滴定溶液的体积V1，ml 空白实验消耗盐酸标准滴定溶液体积V2，ml 盐酸标准滴定溶液的实际浓度c，mol/L 平均盐酸标准滴定溶液的实际浓度c，mol/L 稀释十倍浓度

1 2 3 备注 0.7971 0.8025 0.8038 28.99 29.25 29.27 0.1 0.5206 0.5194 0.5199 0.5199 0.05199 cm(V1V2)*0.0530 0.0530为1/2碳酸钠的毫摩尔质量，g/mmol 二、伊利冰淇淋中蛋白质的测定原始记录表 检验日期：2012年5月18日 样样品 品名称 编号 伊利冰淇淋 伊利冰淇淋 1 耗酸盐酸标准取样量 量溶液浓度m(g) V(mLC（mol/L） ) 0.05199 空白 净耗量 V0(mV-V0-F值 L) (mL) 测定结果 X(%) 平均X% 精密度% 3.1918 2.05 0.25 1.80 6.38 2.62 2.58 3.5 2 0.05199 3.0275 1.90 0.25 1.65 6.38 2.53 检验依据标准：■GB 5009.5-2010第一法 产品标准 SB/ T10013 X计算公式：■(VV0)0.014CF100m10/100 检验员：卢创仪 方健舒 校核员：路健能 结果分析： 实验测得伊利冰淇淋蛋白质含量2.58%大于SB/T 10013-2008中≥2.5%的要求，为合格。精密度3.5%≤10%，符合要求。 注意事项： 1、浓硫酸的使用安全 2、蒸馏装置的正确操作。 3、蒸馏、吸收应注意 （1）整套装置不能漏气。 （2）在蒸汽发生瓶中要加入硫酸和甲基橙使呈酸性，以防氨蒸出。 （3）加碱量要足，应使消化液呈深蓝色或产生黑色沉淀。操作要迅速，漏斗要采用水封防氨逸出。 思考题： 1、 蛋白质消化后，转移定容时应该如何操作？为什么？ 答：应先加入20ml水再进行转移定容，这样可使浓硫酸稀释。避免浓硫酸过高，危险性高。 2、蛋白质测定时，蒸馏完毕应该如何操作？为什么？ 答：将冷凝管尖端提离液面继续蒸1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端的外部。这样可以使装置内的残留得到充分流出，避免误差。 3、 用凯式定氮法测定蛋白质时，如果测定结果偏低，可能影响的因素主要有哪些？ 答：可能是称量误差、消化不充分、蒸馏不充分、开始蒸馏时即刚倒入样液时，未及时用硼酸

吸收、滴定终点判断过早等因素引起。 4、用凯式定氮法测定样品蛋白质含量时，应如何确定合适的称样量？ 答由于实验所用样品是半固体，故称取2~5g为宜。 5、样品进行消化时，加入的浓硫酸、硫酸铜及硫酸钾它们各自的作用？ 答：浓硫酸的作用：脱水作用—使有机物脱水并碳化为C、H、N，氧化作用—将有机物炭化后的碳氧化为二氧化碳，硫酸则被还原成二氧化硫。硫酸钾的作用：提高溶液沸点而加快有机物的分解、加入硫酸铜的作用①催化作用：加速有机物的氧化分解②消化完全的指示③蒸馏时碱性反应的指示 6、 为什么在蒸馏前向水蒸气发生器内装水时要加几毫升硫酸，而在蒸馏样品中却要加入氢氧化钠？ 答。在蒸馏前向水蒸气发生器内装水时要加几毫升硫酸使呈酸性，以防蒸汽发生瓶中可能存在的氨蒸出。 氢氧化钠的作用：使消化液呈碱性，加热蒸馏，即可释放出氨气。 2012年 5 月 18 日 备注 指导老师签名: 年 月 日