人参茎叶总皂苷的提取方法研究

MODERNANIMALHUSBANDRY

现代牧业

Vol. 1 No. 1

Mar. 2017

人参茎叶总皂苷的提取方法研究

宋幸辉，郑宝亮，王长林，王秀君，刘永录，马

霞

，卞陆杰

(河南牧业经济学院，河南郑州450046)

Rg1与人参皂香Re的总量及人参茎叶总皂香的含量为依据，筛选人参茎叶提取物的最佳提取方

法。方法：采取水煎及水煎液不同浓度乙醇（30%、60%、80% )分别提取人参茎叶中总皂香，并进行喷雾干燥,统计各 提取物得率，采用高效液相法检测人参皂香Rg1与Re的总量，采用紫外分光光度法检测人参总皂香含量。结果显 示，以水煎液乙醇终浓度为60%醇沉时所得提取物得率较高，且其中人参皂香Rg1与人参皂香Re的总量和人参总皂 香含量相对较高，综合评价最终确定人参茎叶的提取方法为水煎、60%乙醇醇沉。

摘要：以

人参皂香

关键词：人

参茎叶

；总

皂香

中图分类号：

R284

;提取方法;得率；含量测定

文献标识码：A 文章编号:2096 -2975(2017)01 -0030 -03

Research on Extraction Method of Total Saponins from Ginseng Stem and Leaf

Song Xinghui , Zheng Baoliang , Wang Changlin , Wang Xiujun , Liu Yonglu , Ma Xia , Bian Lujie

(Henan University of Animal Husbandry and Economy , Zhengzhou , Henan 450046 , China)

Abstract ： Objective to explore the optimum extraction method of ginseng stem leaf taking the amount of ginsenoside Rg1 , Re

and Ginseng stem and leaf saponin (GSLS) as evaluating indicators. Methods GSLS was extracted by water decoction and al­cohol sedimentation with different concentrations ethanol (30% , 60% , 80% ). Then recoding the extraction ratios after spray drying. The amounts of ginsenoside Rgland Re were tested by HLPC method , and the total ginseng saponin was determined byUV - spectrophotometry. The result shows that the highest extraction ratio was determined with an ethanol concentration of 60% in alcohol sedimentation. And the amounts of ginsenoside Rgland Re were relatively high. Therefore , the optimum ex­traction method of ginseng stem leaf was taking alcohol sedimentation with 60% concentration ethanol.Key words ： ginseng stem and la , total saponin , extraction method , yield , determination

GinsengFolium )是五加科植物人参 (PanaxginsengCAMey)的干燥叶，性味苦、甘，

人参叶（

. .

寒，归肺、胃经，具有祛暑、补气、益肺、生津之功能。

主要用于治疗暑热烦躁、津伤口渴、咳嗽气虚、四肢 倦乏、头目不清等[1]。国内外学者对人参茎叶化 学、药理学等方面的研究[2]，已初步证明人参茎叶 皂苷成分与人参皂苷成分两者相似，其含量明显比 人参高，且人参茎叶成本比人参低的多，因此，人参 茎叶活性成分的提取备受关注[3]。目前人参茎叶 皂苷的提取方法主要采用加热回流方法进行萃取， 而《中国药典》4]中的提取方法需过大孔吸附树脂

收稿日期：

柱纯化，制约其在临床中的大量生产和使用。

本研究分别采取水煎及水煎不同浓度乙醇 (30%、60%、80% )醇沉的方法提取人参茎叶中总 皂苷，并进行喷雾干燥，比较干燥物得率，检测人参 皂苷1与的含量及人参茎叶总皂苷的含量，

RgRe

为工业化提取人参茎叶皂苷提供新方法，为今后的 开发利用提供参考。

1

材料与方法

1.1试剂与药材

医用酒精、分析甲醇，由天津市富宇精细化工有

2016-12-23

作者简介：宋幸辉（1983 -),女，汉族，河南伊川人，助教,硕士。 • 30 •

宋幸辉，等:人参茎叶总皂苷的提取方法研究

限公司生产;色谱级乙腈，由天津四友精细化学品有 限公司生产;人参茎叶购自禹州市凯旋药业有限公

司，人参皂苷与标准品购自中国食品药品

测定法取配制的供试品溶液和标准品溶液各

10 ^，进注高效液相色谱仪，测定。

L

RglRe

1.4.2紫外分光光度法[2]测定人参茎叶总皂苷的含量。

对照品的制备取对照品人参皂苷过精密称定，加甲醇后，分别制成每1 苷

检定研究所。

1.2仪器

BG-50A电子称；GZX-9030 MBE电热恒温

SHZ—D( III)型旋转

鼓风干燥箱，上海博讯实业有限公司医疗设备厂;电 子分析天平，岛津国际贸易有限公司；22型可见分 光光度计，上海分析仪器总厂;

Re 1 mg的溶液。

L

Re适量，经

mL含人参皂

标准曲线制备精密吸取配制的对照品溶液20、 40、80、120、160和200 ^分别置具塞试管中，在低 蒸发仪由巩义市瑞德仪器设备有限公司；TY

喷雾干燥 机((8000)，杭州聚同电子有限公司；高效液相色

谱仪（型号为P230 n

型）大连依利特分析仪器有限 公司。

1.3人参茎叶的提取处理

取人参茎叶3000 g加45L

水浸泡1 h

，煎煮两

次，每次2 h，过滤，合并滤液浓缩至3000 ml。

处理一:取500 mL浓缩液直接喷雾干燥得样品

1，称重，计算得率；

处理二:取550 mL浓缩液加乙醇至醇浓度为 30%，静置过夜，抽滤，滤液喷雾干燥得样品2,称

重，计算得率；

处理三:取500 mL浓缩液加乙醇至醇浓度为 60%，静置过夜，抽滤，滤液喷雾干燥得样品3,称

重，计算得率；

处理四：取500

mL浓缩液加乙醇至醇浓度为

80%，静置过夜，抽滤，滤液喷雾干燥得样品4,称 重，计算得率。

x得率=干燥物重量（g

)/药液体积（ml

)

100%。

1.4人参皂苷的含量测定

1Re.4.1高效液相色谱法[2]测定人参皂苷

Rg1与

含量。

色谱条件与系统适用性试验以乙腈-0.05% 磷酸溶液(20 : 80)为流动相，柱温30 °C

，检测波长

为203

nm。理论板数按Re峰计算均应不低

于1500。

Re对照品溶液的制备取对照品人参皂苷Rg

1与 Rg适量，加入甲醇后，分别制成每1 mL

含人参皂苷 1 0.25 mg、含 Re0.5 mg 的溶液。

供试品溶液的制备取上述配制样品20

过精密称定后，置于10

mLmg经

量瓶中，加入甲醇后超声

溶解，并稀释至刻度，滤过后，取滤液即得。

温条件下挥去溶剂，mL加入1 %香草醛高氯酸试液0. min5

，置于恒温60C水浴上充分混匀后加热15 ， 立即用冰水冷却2 min后，加入77%硫酸5 mL，摇 匀，在540 nm波长处测吸光度值，以相应试剂作为

空白，以浓度为横坐标，yx

吸光度值为纵坐标，，R

测得标 准曲线 =0.0102+0.06092 =0.9961。

样品含量测定取样品50 mg于25 mL容量瓶 中，加入甲醇溶解后并定容，吸取样品液50 ^L按上

述步骤操作，测吸光度值，以标准曲线计算皂苷

含量。

2

结果

2.1不同提取方法人参茎叶提取物的得率

表1结果可见，未进行醇沉样品1所得提取物 的得率最高为26.2%，样品2次之为24. 3%，样品4 最低为9. 3%。随提取时乙醇浓度的升高，每kg提

取物的成本也相应提高。

表1

不同提取方法人参茎叶提取物得率及成本核算

样品编号得率（％ /成本核算（元/

kg)

样品126.2250样品2

24.3320样品319.7450样品4

9.3

900

2.2不同提取方法样品中人参皂苷的含量

表2结果可见，随提取时乙醇浓度的升高，样品

1 -4中的人参皂苷

Rg1与Re含量及人参茎叶总皂

苷的含量逐渐升高，即样品4中人参皂苷Rg1与Re

含量及人参茎叶总皂苷的含量最高。

表2不同提取方法样品中人参皂苷的含量（％)

样品编号Rg1与Re含量

人参茎叶总皂苷

样品 16.0118.37样品 27.1925.86样品 319.6658.54样品 4

21.65

59.18

•

31

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宋幸辉，等:人参茎叶总皂苷的提取方法研究

3

讨论与结论

人参茎叶中含有丰富的人参皂苷等活性物质，

Rgl与Re含量及人参茎叶总皂苷的含量差别较小。

综合考虑人参皂苷Rgl与Re及人参茎叶总皂苷的

含量以及提取物得率，结合实际生产需要，故将人参茎叶提取物的制备工艺确定为水煎并在乙醇终浓度为60%时醇沉。对其制备的人参茎叶提取物的活性比较拟在后期试验中研究。

参考文献：

并具有很高的保健和药用价值，成本相对较低。大 量的研究证明，人参茎叶中的人参皂苷具有调节中 枢神经系统、抗疲劳、调节机体免疫力、延缓衰老等 作用[5]。在国内外研究中，人参皂苷的提取研究较 多并且成熟，人参茎叶中的人参皂苷的提取研究相 对较少。但是对于人参茎叶中人参皂苷的提取、分 [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）2010年版

离纯化及其药理作用的研究在当前多个领域的发展 中占据重要的地位，比如医药行业、保健、食品等，也 为人参茎叶进一步研究与开发奠定了基础。因此， 从人参茎叶中提取人参皂苷具有重要意义。

目前提取人参皂苷的方法有很多种，溶剂大多 是不同浓度的乙醇。于杰等[6]在人参茎叶总皂苷 提取精制工艺研究中，通过试验表明，人参总皂苷在 用乙醇提取时，乙醇对叶绿素的溶解性较大，不易去 除，影响提取物的质量。本试验采用水煎醇沉的方 法提取人参茎叶总皂苷，克服了上述缺点。

从本试验结果发现，随着提取时乙醇浓度的升 高，提取物得率降低，成本升高，而各提取物中人参 皂苷Rgl与Re

含量及人参茎叶总皂苷的含量也相

应升高。但在乙醇终浓度为60%时制备样品3得 率比80%时样品4的得率高l

倍，而二者人参皂苷

•

32

•

[M].北京：中国医药科技出版社，2〇10. 9.[2] 辛海量，盛佳钰，葛凌弦，等.人参叶提取物的制备工艺研究[].医药导报，2011, 30(1) :79 -82.

[3 ] Hyun Jung Lee, Hyun - Sun Lee, Hye Jin Cho, et al. Uti­lization of hydrolytic enzymes for the extraction of ginsen- osides from Korean ginseng leaves [ J ]. Process Biochemis­try. 2012, 47： 538 -543.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）2010年版

[M].北京：中国医药科技出版社，2010. 365 -366.[5 ]刘海霞，刘洋，郑文成.人参茎叶中人参皂苷的提取、分

离纯化及其药理作用的研究进展[].吉林化工学院学 报，

2014,31(5) :4 -8.

[6]于杰，白志川，付超美.人参茎叶总皂甙提取精制工艺研

究[J].西南农业大学学报：自然科学版，2004 ,6 (4): 479 -482.