羊布氏杆菌对常用抗菌药物的敏感性研究

・５４・　中国感染控制杂志２００６年１月第５卷第１期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　Ｖｏｌ　５　Ｎｏ　１　Ｊａｎ　２０ｏ６　・实验研究・　羊布氏杆菌对常用抗菌药物的敏感性研究　徐修礼，张建芳，张璐，樊新，孙怡群　（第四军医大学西京医院，陕西西安７１００３２）　［摘要］　目的　了解羊布氏杆菌的药敏情况，指导临床合理应用抗菌药物。方法　应用Ｂａｃｔ／Ａｌｅｒｔ　３Ｄ和　ＶＩＴＥＫＩＩ全自动细菌培养鉴定系统培养、分离和鉴定细菌；药敏试验采用Ｅ－ｔｓｔ法。结果　从４例发热患者血培　ｅ养标本中培养分离出４株羊布氏杆菌。４株菌对常用抗菌药物的ＭＩＣ值分别为：庆大霉素０．５－－０．７５　ｍｇ／Ｌ，氨苄　西林１．５－－２．０　ｍｇ／Ｌ，环丙沙星４．０～８．０　ｍｇ／Ｌ，头孢他啶、阿米卡星、强力霉素等均＞８．０　ｍｇ／Ｌ。结论杆菌病应首选庆大霉素，并联合氨苄西林或环丙沙星治疗；或根据药敏结果用药。　治疗布氏　［关键词］布鲁杆菌，羊；布鲁杆菌病；抗菌药物；微生物敏感性试验　［中图分类号］Ｒ３７８．５　２　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１６７１—９６３８（２００６）０１—００５４—０３　Ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｒｏｕｔｉｎｅ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｌｉｔｅｎｅｓｉｓ　ＸＵＸｉｕ—ｌｉ，ＺＨＡＮＧＪｉａｎ—ｆａｎｇ，ＺＨＡＮＧＬｕ，ＦＡＮＸｉｎ，ＳＵＮ　Ｙｉ－ｑｕｎ（ＸｉｊｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，ＴｈｅＦｏｕｒｔｈ　ＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉ—　ｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉａｎ　７１００３２，Ｃｈｉｎａ）　ｌＡｂｓｔｒａｃｔＪ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌａ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｌｉｔｅｎｅｓｉｓ　ｎｄ　ａｉｎｓｔｒｕｃｔ　ｒａｔｉｏｎａｌ　ＵＳｅ　ｏｆ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｇｅｎｔｓ　ｆｏｒ　ｃｌｉｎｉｃ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｂａｃｔｅｒｉａ　ｗｅｒｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｎｄ　ａｉｄｅｎｔｉｉｆｄ　ｅｂｙ　Ｂａｃｔ／Ａｌｅｒｔ　３Ｄ　ｎｄ　ａＶＩＴＥＫ　ＩＩ　ａｕｔｏｍｉｃｒｏｂｉｃ　ｓｙｓｔｅｍ．　Ｄｒｕｇ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　Ｅ－ｔｅｓｔ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｆｏｕｒ　ｓｔｒａｉｎｓ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｌｉｔｅｎｅｓｉｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｂｋｘｘｔ　ｏｆ　４　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｆｅｖｅｒ　ａｎｄ　ＭＩＣ　０ｆ　ｇｅｎｔａｍｉｃｌｎ，ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ　ａｎｄ　ｃｉｐｍｆｌｏｘａｃｉｎ　ＷａＳ　０．５～０．７５　ｒｎｇ／Ｌ，１．５～２．０　ｍｇ／Ｌ　ａｎｄ　４．０～８．０　ｍｇ／Ｌ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＭＩＣ　ｏｆ　ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ．ａｍｉｋａｃｉｎ　ａｎｄ　ｄｏｘｙｃｙｃｌｉｎｅ　ｗｅｒｅ　ａｌｌ　ａｂｏｖｅ　８．０　ｍｇ／Ｌ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｐｒｅｆｅｒｒｅｄ　ｄｒｕｇ　ｆｏｒ　ｔｒｅａｔｉｎｇ　ｂｒｕｃｄｌｏｓｉｓ　ｉｓ　ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ　ｏｒ　ｐｌｕｓ　ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ　ｏｒ　ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ，ｏｒ　ｃｈｏｏｓｉｎｇ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌ　ａａｇｅｎｔｓ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌ　ｓｕｓａｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｅｓｔ　ｒｅｓｕｌｔｓ．　１Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓＪ　Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｌｉｔｅｎｅｓｉｓ；ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ；ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉｌａ　ａｇｅｎｔ；ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｓｔｅ　［Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，２００６，５（１）：５４—５５，６６］　布氏杆菌病（ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ）是一种全世界广泛分　从４例患者的血培养标本中分离出４株羊布氏杆　菌。４例患者均以发热为主诉，发热均＞２周，部分　患者伴关节痛。２例成年女性来自农村，家养有牛　羊；２例成年男性，１例家养狗，另１例为长途运输司　机，无动物接触史。　１．２抗菌药物诺氟沙星、庆大霉素、氨苄西林、阿　布的人兽共患慢性细菌传染病。布氏杆菌可感染人　类、多种家畜和野生动物，引起相似的临床症状与病　理损伤，如发热、流产与不育、慢性关节炎及神经损　害等，导致巨大的经济损失和严重的公共卫生问　题　Ｊ。２００４年６月一２００５年３月，我科共分离出４　株布氏杆菌，均为羊布氏杆菌，且均从血液中分离　米卡星、头孢他啶；复方磺胺甲嗯唑、强力霉素、环丙　沙星、氯霉素、头孢唑林。Ｅ．ｔｅｓｔ试纸条购自瑞典　强ｉｏｄｉｓｋ公司。　出，现将其对常用抗菌药物的敏感性报告如下。　ｌ材料与方法　１．１临床资料２００４年６月一２００５年３月，我们　１．３培养基与仪器Ｍ．Ｈ琼脂购自北京奥博星生　物技术公司。Ｂａｃｔ／Ａ１ｅｎ　３Ｄ全自动血液快速培养　仪和ＶＩＴＥＫⅡ全自动细菌鉴定分析仪均为法国梅　里埃生物有限公司产品。　［收稿日期］２００５—０７—２６　［作者简介］徐修￣Ｌ（１９６２一），男（汉族），吉林省桦甸市人，副　主任技师，主要从事临床微生物检验研究。　１．４细茵培养鉴定抽取患者血液１０　ｍＬ分别注　入Ｂａｃｔ／Ａｌｅｒｔ　３Ｄ仪器专用培养瓶中（分需氧和厌氧　维普资讯 http://www.cqvip.com

中国感染控制杂志２００６年１月第５卷第１期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　Ｖｏｌ　５　Ｎｏ　１　Ｊａｎ　・　５５　・　培养瓶），放人仪器中培养，待仪器报警阳性，取出涂　－６　ｄ报阳性，转种血平板、巧克力平板和麦康凯平　片革兰染色并转种血琼脂平板、巧克力平板和麦康　板，３７℃培养４８　ｈ后，血平板和巧克力平板上生长　凯平板中，置５％二氧化碳（ｃｏ２）环境中培养。获纯　出大小１－－２　１Ｔｌｒｎ、圆形、突起、半透明、有光泽、边缘　菌后，用ＶＩＴＥＫⅡ全自动细菌鉴定分析仪鉴定。　整齐且不溶血的大小相等的小菌落，麦康凯平板上　１，５药敏试验采用Ｅ－ｔｅｓｔ法，将０，５麦氏单位菌　无菌落生长。生长特性与文献报道　Ｊ一致。革兰　液均匀涂布于Ｍ－Ｈ血琼脂平板，５　ｍｉｎ后，贴Ｅ－ｔｅｓｔ　染色为革兰阴性（Ｇ一）球杆菌，染色很弱，象细沙样；　试纸条，室温放置１０　ｍｉｎ，置３５℃和５％ｃｏ２环境　布氏杆菌诊断血清阳性；硫磺和品红耐受试验均阳　中培养２４　ｈ，观察结果。　性；ＶＩＴＥＫⅡ全自动细菌鉴定分析仪鉴定为羊布氏　杆菌。　２结果　２．２最低抑茵浓度（ＭＩＣ）检测结果４株羊布氏　杆菌均对庆大霉素最敏感，其对常用抗菌药物的　２，１细菌生长特性及鉴定结果４份血培养均于４　ＭＩＣ值见表１。　表１　常用抗菌药物对４株羊布氏杆菌的最低抑菌浓度（ｍｇ／Ｌ）　菌号　诺氟沙星　庆大霉素　氨苄西林　头孢他啶　阿米卡星　强力霉索　环丙沙星　氯霉素　头孢唑林　１６．０　０．５０　２．０　２４．０　１２．０　８．０　３２．０　４．０　３２．０　１２８．０　１６．０　０．７５　１．５　２４．０　８．０　１６．０　１６．０　４．０　３２．０　＞１２８．０　１６．Ｏ　Ｏ．７５　２．Ｏ　２４．Ｏ　１２．Ｏ　１６．Ｏ　３２．Ｏ　４．０　３２．０　＞１２８．０　８．０　０．７５　１．５　３２．０　１２．０　１６．０　３２．０　８．０　３２．０　＞１２８．０　Ｌａｎｇ［５　Ｊ等用吡啶羟酸（一种喹诺酮类抗生素）治疗　３讨论　急性期布氏病，他观察了布氏菌凝集滴度都＞１　２８０　的患者，结果显示，治疗３～５　ｄ内患者的发热和其　布氏杆菌在外界环境中生活力较强，在干燥土　他症状均改善，但复发率达６０％。Ｓｏｌｅｒａｔ　６－等认为，　壤、皮毛和乳类制品中可生存数周至数月，在水中可　虽然治疗布氏病的远期疗效不佳，但现阶段较理想　生存５　ｄ～４个月。病畜的多种体液中携带病原菌，　的方案为：（１）口服强力霉素４５　ｄ，肌内注射链霉素　其阴道分泌物特具传染性，乳汁中带菌较多，排菌可　１４　ｄ，或庆大霉素７　ｄ取代链霉素，这也是Ｓａｎｆｏｒｄ　达数月至数年。以前由于内地养羊较少，布氏杆菌　《抗微生物治疗指南》【７　Ｊ中的首选用药；（２）口服强　病发病率较低；患者多为牧羊男性，发病有产羊季节　力霉素＋利福平４５　ｄ（次选方案之一）。目前，世界　性。近年来，随着农村养殖业的发展，牛奶成了常用　上不论使用上述哪一种或哪一组药物治疗急性期布　食品，城镇家庭养宠物者增多，均可能与布氏杆菌病　氏病，均未取得理想效果。　发病率升高有关，也与发病人群及发病季节性变异　布氏杆菌对药物的敏感性可能有地区差异。从　有关。据世界卫生组织（ＷＨＯ）近几年统计，全球有　本药敏结果可以看出，庆大霉素对羊布氏杆菌的抑　近１００万例患者，而且每年以新发病例１～２万例的　菌活性最高（ＭＩＣ为０．５～０．７５　ｍｇ／Ｌ），其次为氨苄　速度增加　Ｊ，故应加强对民众卫生知识的普及，提　西林（ＭＩＣ为１．５－－２．０　ｍｇ／Ｌ）。４株菌对强力霉素　高人们的防病意识和环保意识。　的ＭＩＣ都＞１６　ｍｇ／Ｌ，与文献报道的首选药物为强　长期以来，国内外在治疗急性期布氏杆菌病方　力霉素不一致ｕ．２　Ｊ，可能与动物喂养中滥用药物有　面，根据ＷＨＯ第六次联合公报所制定的原则，用四　关；复方磺胺甲嗯唑的ＭＩＣ为８～１６　ｍｇ／Ｌ，喹诺酮　环素＋链霉素；或依据这一方案的同类药物替换治　类药物环丙沙星ＭＩＣ为４～８　ｍｇ／Ｌ，可作为次选治　疗；国内外还有许多治疗观察，有效率均在６０％左　疗药物；第三代头孢菌素头孢他啶的ＭＩＣ为２４～　右（不包括复发）　Ｊ。由于此方法治愈率不是很高，　３２　ｍｇ／Ｌ，氯霉素为３２　ｍｇ／Ｌ，均不能作为治疗药　复发率较高，人们开始试用其他药物的配伍。　物。我们观察的４例羊布氏杆菌病患者，１例为住　ＳａｌｔｏｇｌｕＮｊ等用利福平＋强力霉素治疗羊布氏菌感　院患者，确诊为布氏杆菌感染后，给予口服利福平治　染的急性期患者，治疗４２　ｄ后，其症状、体征消失。　（下转第６６页）　维普资讯 http://www.cqvip.com

・６６・　中国感染控制杂志２００６年１月第５卷第１期Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　Ｖｏｌ　５　Ｎｏ　１　Ｊａｎ　２００６　因是肺部并发症，以继发肺部感染为主，最终导致呼　３讨论　流行性出血热主要病理生理变化是出血、低血　吸衰竭而死亡。本组肺部感染病例，４例感染发生　于休克期，３例发生于少尿期。　死于电解质紊乱，特别是高血钾、低血钠等可引　起心搏骤停或严重心律失常。本组３例死于电解质　压休克、急性肾衰竭。近年来，由于血液透析技术的　普遍及早期应用，单纯由于急性肾衰竭所致病死者　已大大减少Ｌ２　Ｊ。回顾分析本组３４例流行性出血热　患者病死原因，居首位的是脏器出血，包括脑、肾、　紊乱与心肌损害造成的心搏骤停者，１例死于多尿　期，２例死于少尿期。因此，应定期检测各期电解质　情况，一旦出现紊乱，应及时纠正。　流行性出血热的早期临床表现可以很不典型，　症状多种多样，以致部分患者尤其是青壮年患者在　疾病早期未能引起足够重视，甚至被误诊、误治，一　脾及消化道出血（共１６例，占４７．０６％）。这主要是　由于流行性出血热患者大多血小板数目减少、功能　异常，凝血机制障碍所致；本组中血小板计数最低者　仅７．５×１０　／Ｌ，血小板均数为１８×１０　／Ｌ。有些患　者凝血酶原时间极度延长，甚至达４０　Ｓ以上。故在　疾病早期应定期检测血小板、凝血酶原时间，一旦发　旦病情加重再来院就诊时往往为时已晚。本组病死　者中，１７例为青壮年，其中１０例发病初期未及时就　医，自以为是“感冒”而未重视，以致贻误病情，最终　现血小板呈进行性下降（＜２０×１００／Ｌ），尽早输注新　鲜血小板；对于凝血酶原时间极度延长者，可以应用　凝血酶原复合物，这对防止脏器出血有一定帮助。　病死；另有７例在当地医院分别被误诊为感染性休　克、败血症、白血病，因治疗方法不当，失去抢救时机　而死亡。对流行性出血热，应及时准确地作出诊断，　脏器出血的１６例患者中仅２例死于多尿期，其余均　死于休克少尿期。死于脑梗死患者极少见，本组１　例死于脑梗死者系老年患者，处于多尿期时突发脑　梗死而死亡。因此，对老年患者要注意血液流变学　积极治疗；于早期积极抗休克治疗，适量（５～１０　ａｒｇ）应用地塞米松，减少并发症，合理使用抗生素，　是临床治疗中不可忽视的问题。　［参考文献］　［１］刘俊彬．实用传染病学［Ｍ］．第２版．北京：人民卫生出版社，　１９９８．２１６．　的变化，尤其对多尿期伴有脱水者，需注意预防脑梗　死的发生。　由于抗生素的早期应用，流行性出血热并感染　者已较前减少，但仍有极少数患者在休克期、少尿期　由于机体极度虚弱，抵抗力下降，加上肺部有液体渗　出和出血，肺泡上皮尿素氮沉积，极易诱发感染【３　Ｊ；　同时存在肾衰竭，抗生素的应用受到限制，一旦继发　严重肺部感染，治疗很困难。居本组第２位病死原　（上接第５５页）　［２］曹治涵．血液透析在治疗熏型危重型流行性出血热中的应用　［Ｊ］．湖南医科大学学报，１９９４，９（５）：４２６．　［３］杨守京，刘彦仿，刘莹莹，等．原位分子杂交和免组化检测呼吸　系统流行性出血热病毒感染和免疫复合物的分布［Ｊ］．中华传　染病杂志，１９９５，１３（１）：１８．　疗，１周后病情明显好转，患者要求出院治疗，嘱其　口服强力霉素和利福平继续治疗观察；其他３例均　为门诊患者，无法跟踪随访，治疗情况及预后无从得　知。但从我们的试验结果看，对羊布氏杆菌引起的　感染，应首选庆大霉素并联合氨苄西林或环丙沙星　治疗。采用经验治疗并不一定能达到良好的治疗效　学检验杂志２００１，２４（３）：１８２．　，静　［３］王大力，张士义．急性期布氏病治疗研究进展［Ｊ］．中国地方病　防治杂志。２００１，１６（２）：９４—９５．　［４］Ｓａｌｏｔｇｌｕ　Ｎ，ＴａｓｏｖａＹ，ＩｎａｌＡＳ，ｅｌ；ａ１．Ｅｆｆｉｃａｃｙｏｆ　ｒｉｆａｍｐｉｃｉｎ　ｐｌｕｓ　ｄｏｘｙｃｙｃｌｉｎｅ　ｖｅｒｓｕｓ　ｒｉｆａｍｐｉｃｉｎ　ｐｌｕｓ　ｑｕｉｎｏｌｏｎｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｓａｕｄｉ　Ｍｅｄ　Ｊ，２００２，２３（８）：９２１—９２４．　［５］【且ｎｇ　Ｒ，Ｒｕｈｉｎｓｔｅｉｎ　Ｅ．Ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｈｒｕｃｃｌｌ￣ｓｉｓ　［Ｊ］．Ｊ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ　Ｃｈｅｒｎｏｔｈｅｒ，１９９２．２９（４）：３５７—３６０．　［６］Ｓｏｌｅｒａ　Ｊ，Ｇｅｉｊｏ　Ｐ，ｌａｒｇｏ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｒｎｄａｏｍｉｚｅｄ，ｄｏｕｂｌｅ　ｂｌｉｎｄ　ｓｔｕａｙ　ｔｏ＆￣ＳｅＳｓ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｄｕｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｏｘｙｃｙｄｉｎｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｆ０ｒ　果，故对羊布氏杆菌感染者，应根据药敏试验结果及　时调整抗菌药物。　［参考文献］　［１］张卓然，倪语星．临床微生物学和微生物检验［Ｍ］．第３版．北　京：人民卫生出版社，２００３．１８４—１８６．　ｈｌｍ＇ｍｎ　ｂｒｕｃｅｌｌｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ，２００４，３９（１２）：１７７６—　１７８２．　［７］桑福德（Ｓａｎｆｏｒｄ）．抗微生物治疗指南（Ｇｕｉｄｅ　ｔｏ　Ａｎｔｉｍｉｃｍｂｉａｌ　Ｔｈｅａｒｐｙ）［Ｓ］．第３４版．上海：第＝军医大学，２００４．４０，４８，　５１．　［２］张小江，徐英春．从血液中分离出羊布氏杆菌一例［Ｊ］．中华医