维普资讯 http://www.cqvip.com 中国医院药学杂志２００２年第２２卷第７期Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，２００２ Ｊｕｌ，Ｖｏｌ ２２，Ｎｏ．７ 信号变化率的大小。 表１ 导数法与常规法测定铬的灵敏度、精密度与检出限的 比较 Ｔａｂ １ Ｃｏｍｐａｒｉ￣ｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ａｎｄ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｃｈｒｏｍｉｕｍ— Ａ Ｂ Ｅ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ 图１ 导数原子吸收测量系统 Ａ光源笔记录仪Ｂ火焰Ｃ单色器Ｄ．检测器Ｅ导数测量装置Ｆ．双 ａ．常规原子吸收信号ｂ．导数原子吸收信号 表２样品测定结果及回收率 Ｆａｂ ２ Ｒｅｓｕｌｔ ａｎｄ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ Ｆｉｇ １ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ａｔｏｍ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ Ａ ｌｉｇｈｔ ｓｉｇｈｔ ｓｏｕｒｃｅ Ｂ ｆｌａｍｅ Ｃ．ｍｏｎｏｃｈｒｏｍａｔｉｃ ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ Ｄ．ｔｅｓｔ ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ Ｅ．ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｔｅｓｔ ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ Ｆ．ｄｏｕｂｌｅ—ｐｅｎ ｒｅｃｏｒｄ ｅｑｕｉｐ— ｍｅｎｔ ａ．ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ａｔｏｍ ａｂｍｒｂａｂｌｅ ｓｉｇｎａｌ ｂ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ａｔｏｍ ａｂ— ｓｏｒｂａｂｌｅ ｓｉｇｎａｌ ３．３测定方法比较 导数原子吸收法与常规原子 吸收法测定铬的灵敏度、精密度、检出限的比较结果 见表１。 参考文献： ［１］赖明坚，林绍平五安二补酒治疗气血两虚、风寒湿痹、。肾阳虚 １０８例临床观察［Ｊ］．中成药，１９９５，１７（７）：２６． ［２］朱秉臣，钟毅，郑仕富，等益寿调脂片调脂和抗自由基损伤的 研究［Ｊ］．广州中医药大学学报，１９９９，１６（１）：１５． ［收稿日期］２００１—０６—１６ ３．４样品的测定结果及回收率的测定，测定结果见表２。 分别测定了六味 地黄丸、枸杞子中的微量铬的含量并进行了回收率 高效液相色谱法测定５一氨基水杨酸结肠溶胶囊的含量 胡容峰 ，晏霆 ，吕凌 ，曹明成 （１．安徽中医学院药剂教研室，安徽合肥２３００３８；２．国药集团国怡药 ｌｋｑｇＮｇ｝Ｎ，安徽 淮南２３２００７；３．安徽省药物研究所，安徽合肥２３００１１；４．安徽省医药科技实业公司，安徽合肥２３００２２） ［摘要］ 目的：测定５一氨基水杨酸结肠溶胶囊的含量。方法：采用Ｉ－ＩＰＬＣ法，填充剂：ＯＤＳＣｌ８（２５ｏ ｎ－ｉ１￣Ｘ ４．５ ｍ丌１，５肿）；流动 相：Ａ＿乙腈（７７：２３，其中Ａ为四丁基硫酸氢铵一醋酸钠＝３．４ ｇ：１．４ ｇ，配成１０００ ｍ１）；检测波长：２４０ ｎｎｌ；流速：１ ｍｌ・ｍｉｎ一１，进 样量：２０ ｌ。结果：５一ＡＳＡ平均回收率为１００．１８，ＲＳＤ为０．７５％。结论：本法结果准确可靠。 ［关键词］ 高效液相色谱法；５一氨基水杨酸；结肠溶胶囊 ［中图分类号］Ｒ９２７．２ ［文献标识码］Ａ ［文章编号】１００１—５２１３（２００２）０４—０４１１－０２ ＨＰＬＣ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ５－ＡＳＡ ｉｎ ｃｏｌｏｎ－ｒｅｌｅａｓｅ ｃａｐｓｕｌｅｓ ＨＵ Ｒｏｎｇ—Ｆｅｎｇ，ＹＡＮ Ｔｉｎｇ，ＬＵ Ｌｉｎｇ，ｅｔ ａｌ（Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｏｆ Ａｎｈｕｉ．Ａｎｈｕｉ Ｈｅｆｅｉ ２３００３８） ＡＢＳＴＲＡＣｒ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｅ ｏｆ ５－ＡＳＡ ｉｎ ｃｏｌｏｎ—ｒｅｌｅａｓｅ ｃａｐｓｕｌｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ ｅＨｉｇｈ—ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏ— ｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｗａｓ ｕｓｅｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ Ａ ｍｅａｎ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ １００．１％ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮＳ Ａｎ ａｃｃｕｒａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉ— ｎａｔｉｏｎ ｏｆ ５－ＡＳＡ ｉｎ ｃｏｌｏｎ—ｒｅｌｅａｓｅ ｃａｐｓｕｌｓ ｉｅｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ． ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：５－ＡＳＡ：ｃｏｌｏｎ—ｒｅｌｅａｓｅ ｃａｐｓｕｌｅｓ；Ｈｉｇｈ—ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ 溃疡性结肠炎为结肠炎症性疾病，该病发病率 近１０年呈上升趋势。在治疗上，首选药是５一氨基水 杨酸（５一ＡＳＡ）和水杨酸偶氮磺胺吡啶（ＳＡＳＰ）【 ・ 。 一进行研究。 １仪器与试药 １．１ 仪器ＨＰ１１００型高效液相色谱仪（四元泵， 些新药５一ＡＳＡ制剂，口服后在小肠内就释放出相 当量的５一ＡＳＡ，且被迅速吸收，经乙酰化后由尿排 ＤＡＤ检测器，ｋＩＰ化学工作站）。 １．２试药５一ＡＳＡ肠溶胶囊（安徽省医药科技实业 出。它们可能会影响肾功能，且大部分药物不能到 达结肠或小肠下部。为了克服５－ＡＳＡ口服后迅速 从小肠吸收，制成结肠溶胶囊，并对其含量测定方法 公司提供，批号：９８１２２５，９８１２２８，９８１２２９）；５一ＡＳＡ对 照品（安徽省医药科技实业公司提供）；内标物：苯 甲酸钠（分析纯，含量９９．５％以上，安徽省医药科技 维普资讯 http://www.cqvip.com ・４１２・ 中国医院药学杂志２００２年第２２卷第７期Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，２００２ Ｊｕｌ，Ｖｏｌ ２２，Ｎｏ ７ 实业公司提供）；四丁基硫酸氢铵为色谱用试剂；乙 腈为色谱纯；磷酸二氢钾、醋酸钠、氢氧化钠均为分 析纯。 ２方法与结果 测定项下方法测定，计算回收率。经实验测得平均 回收率为９９．０７％，ＲＳＤ＝０．５４％（ ＝５）。 ２．５稳定性及精密度实验表１ 稳定性与精密度实验结果 将对照品溶液放置，每 隔１５ ｍｉｎＬ￣ｆ：续进样６次，结果见表１。 ２．１测定方法＿ｊ ２．１．１ 色谱条件填充剂：ＯＤＳ Ｃ１８；流动相：Ａ（四 Ｔａｂ １ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｔｅｓｔ 丁基硫酸氢铵一醋酸钠＝３．４ ｇ：１．４ ｇ，配成１０００ ｍｌ， 水为溶媒，用１ ｍｏｌ－Ｌ 氢氧化钠调节ｐＨ ６．６），Ａ一 乙睛（７７：２３）；检测波长：２４０ ｒｉｍ；流速： １ ｍｌ・ｍｉｎ一；进样量：２０ ｌ。 ２．１．２ 缓冲液的制备 磷酸二氢钾一氢氧化钠 （６．８ ｇ：１．６５ ｇ）配成８００ ｍｌ，用１ ｍｏｌ・Ｌ～ 氢氧化钠 调节ｐＨ７．５，用水稀释成１０００ ｍｌ。 ２．１．３内标溶液及对照品溶液的制备（１）内标溶 表１表明，本试验精密度较好，本试验过程中， 样品溶液长时间放置易变黄，所以最好采用棕色瓶 液：取内标物苯甲酸钠适量加缓冲液制成每１ ｍｌ含 １．４ ｍｇ的溶液。（２）对照品溶液：取５－ＡＳＡ对照品 约５０ ｍｇ，精密称定，置１００ ｍｌ容量瓶中，用缓冲液 稀释至刻度。取该溶液与内标溶液各５．０ ｍｌ，置 ２５ ｍｌ容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度，摇匀，即得。 ２．１．４供试品溶液的制备 精密称取本品内容物 适量（约相当于５－ＡＳＡ ２５０ ｍｇ），置５００ ｍｌ量瓶中， 加缓冲液３００ ｍｌ，超声溶解并用缓冲液稀释至刻度， 摇匀。精密吸取该溶液与内标溶液各５．０ ｍｌ，置 ２５ ｍｌ量瓶中，用缓冲液稀释至刻度，摇匀，滤过。弃 去初滤液，取续滤液，即得。 避光保存，且根据上述结果，样品溶液宜在１．５ ｈ内 完成测定。 ２．６灵敏度实验取上述对照品溶液，稀释（１００， ２００，……倍数）按上述色谱条件进样，结果测得其 灵敏度为２ ｎｇ（ｓ／ｎ＝３）。 ２．７样品测定分别精密量取供试品溶液和对照 品溶液各２０ ｌ，按色谱条件注入液相色谱仪（见图 １），按内标法以峰面积计算含量。３批号含量分别 为１０２．０５％．１００．３０％，９８．９５％。 ２．１．５系统适应性试验２４０３．３７，分离度为２．０。 取对照品溶液，按色谱条 件进样，记录色谱图。结果理论板数按５－ＡＳＡ计为 ２．２干扰试验按处方称取本品辅料，照样品溶液 图１ 对照品溶液的高效液相色谱图 Ｆｉｇ １ ＨＰＬＣ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓｏＩｕｔｉ０ｎ 制备方法配制溶液（不加内标），记录色谱图３０ ｍｉｎ，结果无任何干扰峰出现，辅料无干扰。 ２．３ 标准曲线的制备 精密称取对照品 ５０．１６ ｍｇ，置１００ ｍｌ量瓶中，用缓冲液稀释至刻度。 ３讨论 ５一氨基水杨酸原料的含量测定方法为永停滴定 精密量取该溶液与内标溶液各２，３，４，５，６ ｍｌ，分别 置２５ ｍｌ容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度，摇匀。各 ＪＲ２０ ｔ４进样，记录色谱图，量取峰面积，由峰面积 （Ａ）对溶液浓度（Ｃ）线性回归，得回归方程（”＝５）： Ａ＝３．９９３×１０ Ｃ＋２．６２１×１０ （ｒ＝０．９９９６），在 法，滴定法繁琐，受环境的影响较大。参照美国药典 采用 ＬＣ法，为了简化操作，将梯度淋洗改为等 度洗脱，结果表明，方法可行，可达到理想的分离效 果。 参考文献： ［１］关吉力，孟云霞，樊艳华，等．缺血性结肠炎的内镜与临床研究 ［Ｊ］．中华消化内镜杂志，１９９８，１５（５）：２１２． ［２］周怡和，巫协宁５一氨基水杨酸缓释剂的药代动力学及其与肠 道ｐＨ的关系［Ｊ］．国外医学消化系统疾病分册，１９９６，１６（８）： １５４ ０．０４０１３－－０．１２０４ ｍｇ・ｍｌ 浓度范围内呈线性。 ２．４ 回收率试验精密称取对照品约４０．０，５０．０， ６０．０ ｍｇ，各３份，分别加相应的辅料，并按供试品 溶液的制备方法配制供试品溶液。另精密称取对照 品适量，按对照品溶液的制备方法配制对照品溶液。 ［３］ＵＳＰＸ Ｘ ｌ＼ 一ＮＦⅦ［Ｍ］Ｓｅｖｅｎｔｈ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ Ｍｅ￣ｌａｍｉｎｅ，２０００， ３９０５． 分别取该溶液及对照品液各２０ ｌ，注入液相色谱 仪，记录色谱图，并按内标法以峰面积计算，按含量 ［收稿日期］２００１一Ｏ６—２１