(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 107287139 A(43)申请公布日 2017.10.24
(21)申请号 201710656548.5(22)申请日 2017.08.03
(71)申请人 北京泰克美高新技术有限公司
地址 100070 北京市丰台区科学城星火路
10号1号楼152室（园区）(72)发明人 王兵 耿艳丽 陈尚义 殷淑超 吕伟青 高鹏鹏 (74)专利代理机构 北京集佳知识产权代理有限
公司 11227
代理人 温可睿 赵青朵(51)Int.Cl.
C12N 1/20(2006.01)A01N 63/02(2006.01)C09K 17/40(2006.01)A01P 1/00(2006.01)
权利要求书1页 说明书9页
C05G 3/04(2006.01)C05G 3/00(2006.01)C09K 101/00(2006.01)C12R 1/125(2006.01)C12R 1/10(2006.01)C12R 1/07(2006.01)C12R 1/11(2006.01)
CN 107287139 A(54)发明名称
一种微生物制剂及其制备方法与在改善连作障碍中的应用(57)摘要
本发明涉及微生物农业技术领域，尤其涉及一种微生物制剂及其制备方法与在改善连作障碍中的应用。本发明提供了一种微生物制剂及其制备方法与应用，该微生物制剂采用枯草芽孢杆菌发酵制得，发酵的培养液中虾蟹壳、胶原蛋白、氯化钠、氨基酸、碳水化合物和复合肥，从而使得该制剂不仅能够起到抑制有害菌的作用，还能够为作物提供大量的营养物质。实验表明，本发明提供的微生物制剂制成菌剂对致病菌的抑菌圈
大田实验表明，该菌剂对可达对照组的6倍以上。
土壤中的微量元素含量存在显著的提高，改善因连作引起的人参、三七、地黄等病害。
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权 利 要 求 书
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1.一种微生物制剂，其特征在于，由菌种、虾蟹壳、胶原蛋白、氯化钠、复合氨基酸、碳水化合物和复合肥制得；
所述菌种包括枯草芽孢杆菌；所述菌种、虾蟹壳、胶原蛋白、氯化钠、氨基酸、碳水化合物、复合肥的质量比为(0.1～1)：(0.1～10)：(0.01～1)：(0.01～9)：(1～50)：(1～20)：(1～10)。
2.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述菌种还包括苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌；所述枯草芽孢杆菌与苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌的数量比为(0.5～5)：(0.5～5)：(0.5～5)：(0.5～5)。
3.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述复合氨基酸由海带发酵液、一水硫酸锌和四水合七钼酸铵组成，其中每80mL～120mL海带发酵液中添加一水硫酸锌20g～40g和四水合七钼酸铵1g～3g。
4.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述碳水化合物选自葡萄糖、果糖或蔗糖。
5.根据权利要求1所述的微生物制剂，其特征在于，所述复合肥中N、P、K的质量比为(10～20)：(10～20)：(10～20)。
6.权利要求1～5任一项所述的微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括：步骤1：将菌种、虾蟹壳、胶原蛋白、氯化钠与水混合，进行第一发酵，制得培养液；步骤2：复合氨基酸、碳水化合物、复合肥与所述培养液混合，进行第二发酵，制得微生物制剂；
所述第一发酵的温度为25℃～35℃；时间为3天～5天；条件为鼓泡通气；所述第二发酵的温度为25℃～35℃；时间为3天～5天；条件为鼓泡通气。7.权利要求1～5任一项所述的微生物制剂在抑制植物病原菌、改善土质、改善作物连作障碍中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述植物病原菌为尖孢镰刀菌、疫病菌等；所述作物为人参、三七或地黄。
9.一种微生物菌剂，其特征在于，包括以下体积份的：权利要求1～5任一项所述的微生物制剂1份；表面活性剂0.001份～0.02份；水1份～10份。
10.一种抑制植物病原菌、改善土质和/或改善作物连作障碍的方法，其特征在于，将权利要求9所述的微生物菌剂施用于农田；所述施用的剂量为100L/亩～1000L/亩。
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一种微生物制剂及其制备方法与在改善连作障碍中的应用
技术领域
[0001]本发明涉及微生物肥料技术领域，尤其涉及一种微生物制剂及其制备方法与在改善连作障碍中的应用。
背景技术
[0002]农药、化肥是现代农业必不可少的农用物资，在满足人们对粮食增长的需求的同时，也付出了高昂的生态环境及资源代价。如化肥和化学农药在土壤中具有化学固定作用，超量施用可以造成土壤板结、土壤酸性增加等不良后果，同时，必然导致地表及地下水污染的加重，我国地面水体多已受到氮、磷等营养物质的污染。大量施用化肥、农药还造成许多生物种群数量急剧减少，甚至灭绝，严重破坏了生态平衡，长期频繁使用化学农药可导致病菌、虫害出现抗药性，使化学农药本身的药效逐渐降低，为达到杀菌目的就需加大用药量。这样，不仅会提高农业成本，还使农药残留量激增，对人体健康十分不利，又严重污染环境。[0003]同一作物或近缘作物连作以后，即使在正常管理的情况下，也会产生产量降低、品质变劣、生育状况变差的现象，这就是连作障碍。传统理论认为，作物连作障碍的原因主要有三大方面，即土壤微生物引起的病害、根际化感自毒作用和土壤营养不足。也有些理论认为是土壤理化性状的恶化，如土壤酸化板结和透气性下降。而目前的解决措施大多都将目光集中在微生物病害上，虽有效果但却并不理想。另外，自毒和病原微生物影响应该是一个短期影响，在人参生长过程中分泌的自毒物质应该会在较短时间内自然降解；土壤微生物菌群也会在一定时间内通过自然调节而得到恢复。[0004]人们在逐渐认识上述问题后，微生物药肥应运而生。微生物药肥是以微生物的生命活动导致作物得到特定肥料效应和/或防治病虫害效应的一种微生物活体制品。微生物药肥中含有大量有益微生物，可以改善作物营养条件、固定氮素和活化土壤中一些无效态的营养元素，创造良好的土壤微生态环境来促进作物的生长，同时能够对植物的病虫害起到抑制作用。并且，微生物药肥对害虫天敌无害，对人畜无害，不污染环境。[0005]目前已经研制生产的微生物药肥尚存在许多不足之处。其配方不合理，加工方式大多采用成品菌剂与填料混合，缺少发酵代谢产物，严重影响了微生物肥料的功效。发明内容
[0006]有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种微生物制剂及其制备方法与在改善连作障碍中的应用，该微生物制剂能够对植物病原菌起到良好的抑制作用，改善土壤营养与质地，并能改善作物连作障碍。[0007]本发明提供的微生物制剂，由菌种、虾蟹壳、胶原蛋白、氯化钠、复合氨基酸、碳水化合物和复合肥制得；所述菌种包括枯草芽孢杆菌；[0008]菌种、虾蟹壳、胶原蛋白、氯化钠、氨基酸、碳水化合物、复合肥的质量比为(0.1～1)：(0.1～10)：(0.01～1)：(0.01～9)：(1～50)：(1～20)：(1～10)。[0009]本发明选择枯草芽孢杆菌与其他细菌进行复配，配合虾蟹壳、胶原蛋白、氯化钠、
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氨基酸、碳水化合物、复合肥进行发酵，所制得的生物制剂中存在大量的活菌。作为优选，本发明提供的微生物制剂中活菌数不低于1×109个/mL～20×109个/mL。优选的，微生物制剂中活菌数为1×1010个/mL。且，本发明提供的微生物制剂中含有大量的有机质、中微量元素，从而能够恢复土壤肥力并兼顾杀灭致病微生物，有效调节土壤微生态组成、优化土壤营养成分、提高土壤的生物活性，改善作物连作障碍。[0010]所述菌种还包括苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌；所述枯草芽孢杆菌与苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌的数量比为(0.5～5)：(0.5～5)：(0.5～5)：(0.5～5)。
[0011]枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，现有技术中常将其用于污水处理、水产养殖领域。研究表明，其能产生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，对土壤致病菌抑制作用强。本发明中采用的枯草芽孢杆菌菌株来自中国农业微生物菌种保藏管理中心，编号为ACCC No.10242。
[0012]苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)，可产生两大类毒素，即内毒素(伴胞晶体)和外毒素，使害虫停止取食，最后害虫因饥饿和死亡。本发明中采用的苏云金芽孢杆菌菌株来自中国农业微生物菌种保藏管理中心，编号为ACCC No.01599。[0013]地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)能产生抗活性物质，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖，还具有固氮或作物根际促生能力。本发明中采用的地衣芽孢杆菌菌株来自中国农业微生物菌种保藏管理中心，编号为ACCC No.02975。[0014]巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，为常见的油中腐生菌，在工业上用于生产葡萄糖异构酶，同时也是有机磷的分解菌，因此，在农业上可用于制造磷细菌肥料。本发明中采用的巨大芽孢杆菌菌株来自中国农业微生物菌种保藏管理中心，编号为ACCC No.04314。
[0015]一些实施例中，微生物制剂由以下质量份的原料制得：[0016]枯草芽孢杆菌0.1份、虾粉1份、胶原蛋白0.01份、NaCl 9份、复合氨基酸1份、碳水化合物20份、复合肥1份。[0017]一些实施例中，微生物制剂由以下质量份的原料制得：[0018]枯草芽孢杆菌1份、蟹粉0.1份、胶原蛋白1份、NaCl 0.01份、复合氨基酸50份、碳水化合物1份、复合肥10份。[0019]一些实施例中，微生物制剂由以下质量份的原料制得：[0020]枯草芽孢杆菌0.5份、苏云金芽孢杆菌0.5份、地衣芽孢杆菌0.5份、巨大芽孢杆菌0.5份，蟹粉0.5份、胶原蛋白0.05份、NaCl 0.9份、复合氨基酸2份、碳水化合物3份、复合肥3份。
[0021]一些实施例中，微生物制剂由以下质量份的原料制得：[0022]枯草芽孢杆菌0.3份、苏云金芽孢杆菌0.2份、地衣芽孢杆菌1份、巨大芽孢杆菌0.3份、虾蟹粉1份、胶原蛋白0.05份、NaCl 0.05份、复合氨基酸10份、碳水化合物20份、复合肥10份。
[0023]氨基酸(amino acid)是重要的营养物质，本发明所用复合氨基酸的主要成分为含甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸等。其来源不限制，可以
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是动物或者植物酸解、碱解制得，也可以是微生物发酵制得。本发明中，所述复合氨基酸由海带发酵液、一水硫酸锌和四水合七钼酸铵组成，其中每80mL～120mL海带发酵液中添加一水硫酸锌20g～40g和四水合七钼酸铵1g～3g。[0024]所述海带发酵液可由市售而得，也可经微生物发酵、酶解制得。[0025]碳水化合物(carbohydrate)为能量物质，本发明中，碳水化合物选自葡萄糖、果糖或蔗糖。
[0026]本发明中，复合肥中N、P、K的质量比为(10～20)：(10～20)：(10～20)。[0027]其中N、P、K均为水溶性的组分存在，如：NO3-、NH4+、PO3-、PO43-、HPO42-、H2PO4-、P6O186-、P2O74-、K+。
[0028]一些实施例中，复合肥氮磷钾的存在形式为NH4NO3/K2HPO4/KH2PO4，N/P/K＝15/15/15、N/P/K＝15/15/17或N/P/K＝15/15/20。[0029]本发明对虾蟹壳的来源不限制，可以是江河湖海任意来源的富含几丁质的水生动物外壳，也可包含肉质，本发明中所述虾蟹壳为干燥品经粉碎后过20目～100目筛的细颗粒粉末。优选为虾壳粉、蟹壳粉或虾蟹粉。[0030]本发明中，胶原蛋白为动物皮粉碎或提取的粉末，其中胶原的含量为30％～65％。一些实施例中，胶原蛋白为猪皮胶原蛋白。另一些实施例中，胶原蛋白为鱼皮胶原蛋白。另一些实施例中，胶原蛋白为牛皮胶原蛋白。
[0031]本发明提供的微生物制剂的制备方法，包括：[0032]步骤1：将菌种、虾蟹壳、胶原蛋白、氯化钠与水混合，进行第一发酵，制得培养液；[0033]步骤2：氨基酸、碳水化合物、复合肥与培养液混合，进行第二发酵，制得微生物制剂。
[0034]本发明中，第一发酵的温度为25℃～35℃；时间为3天～5天；条件为鼓泡通气；第二发酵的温度为25℃～35℃；时间为3天～5天；条件为鼓泡通气。[0035]一些实施例中，第一发酵的温度为28℃～32℃；时间为3天；条件为鼓泡通气；第二发酵的温度为28℃～32℃；时间为3天；条件为鼓泡通气。[0036]发酵液pH维持在6.6～7.0。优选为7.0。[0037]鼓气速率20L/min，溶氧量为20％。[0038]本发明中，步骤1中与水混合后，菌种的质量分数为0.1‰～1‰；虾蟹壳的质量分数为0.1‰～10‰；胶原蛋白的质量分数为0.01‰～1‰；氯化钠的质量分数为0.01‰～9‰；
[0039]步骤2中与培养液混合后，氨基酸的质量分数为1‰～50‰；碳水化合物的质量分数为1‰～20‰；复合肥的质量分数为1‰～10‰。[0040]步骤1中所述水为生活用水。
[0041]本发明提供的微生物制剂在抑制植物病原菌、改善土质、改善作物连作障碍中的应用。
[0042]本发明实施例中，所述植物病原菌为尖孢镰刀菌、疫病菌等；所述作物为人参、三七或地黄。
[0043]本发明提供的微生物制剂经实验证实，具有非常高的菌体密度，具有一定的杀菌、抑菌作用，且能够增加土壤中微量元素的含量，改善连作导致的作物发病率升高现象。优选
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的，本发明所述抑制植物病原菌是指抑制尖孢镰刀菌；本发明所述改善作物连作障碍为改善人参的连作障碍；本发明所述改善土质是指提高土壤中的微量元素含量。[0044]本发明提供的微生物菌剂可以单独作为微生物菌剂使用，也可进一步稀释或复配天然表面活性剂后制成微生物菌剂。本发明提供的微生物菌剂包括本发明提供的微生物制剂与表面活性剂。一些实施例中，微生物菌剂包括微生物制剂1份；表面活性剂0.001份～0.02份；水1份～10份。
[0045]所述表面活性剂选自无患子提取液、皂角提取液或甜菜碱。[0046]本发明所述无患子提取液为经水提得到，其制备方法为：将无患子种皮烘干粉碎，加水提取，60℃回流2小时，提取3次，过滤，将多次过滤后的提取液混合均匀后进行浓缩，获得浓缩后的所述无患子提取液。提取液与原料质量比为4:1。[0047]本发明所述皂角提取液也为经热水提得到，其制备方法为：把已经去籽的皂角(可剪成段)清洗干净并放入容器中，加水后大火煮开小火慢熬至皂角软烂(水为皂角的5倍左右)，冷却后，过滤。再将过滤后的原液倒回锅里，熬煮1小时后，冷却，过滤，将两次提取物混合即为所述的皂角提取液。
[0048]一种抑制植物病原菌、改善土质和/或改善作物连作障碍的方法，将本发明提供的微生物菌剂施用于农田，使用的剂量为100L/亩～1000L/亩。[0049]所述施用的方式选自：根灌、喷洒、涂抹、浸润，或者将微生物菌剂吸附于填充剂进行撒播。所述填充剂选自硅藻土、珍珠岩、赤玉土或泥炭土。[0050]本发明提供了一种微生物制剂及其制备方法与应用，该微生物制剂采用枯草芽孢杆菌发酵制得，发酵的培养液中虾蟹壳、胶原蛋白、氯化钠、氨基酸、碳水化合物和复合肥，从而使得该制剂不仅能够起到抑制有害菌的作用，还能够为作物提供大量的营养物质。实验表明，本发明提供的微生物制剂制成菌剂对致病菌的抑菌圈可达对照组的6倍以上。大田实验表明，该菌剂对土壤中的微量元素含量存在显著的提高，改善因连作引起的人参病害。具体实施方式
[0051]本发明提供了一种微生物制剂及其制备方法与在改善连作障碍中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。[0052]本发明采用的试材、仪器皆为普通市售品，皆可于市场购得。[0053]下面结合实施例，进一步阐述本发明：[0054]实施例1
[0055]枯草芽孢杆菌0.1kg、虾粉0.1kg、胶原蛋白0.01kg、NaCl 9kg、氨基酸1kg、碳水化合物3kg、复合肥1kg。[0056]其中，胶原蛋白为鱼皮胶原蛋白，氨基酸为每80mL海带发酵液中添加一水硫酸锌20g和四水合七钼酸铵1g制成，碳水化合物为蔗糖、复合肥中N/P/K＝15/15/15。[0057]水1000L，加入菌种、虾壳粉、胶原蛋白、NaCl鼓泡通气进行培养，培养温度保持在30℃，培养时间为3天；
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在一次培养的基础上，加入氨基酸、碳水化合物、复合肥，继续鼓泡通气进行培养，
培养温度保持在30℃，培养时间为4天，即得微生物制剂。[0059]实施例2
[0060]枯草芽孢杆菌0.5kg、蟹粉0.1kg、胶原蛋白1kg、NaCl 0.01kg、氨基酸5kg、碳水化合物1kg、复合肥5kg。[0061]其中，胶原蛋白为猪皮胶原蛋白，氨基酸为每120mL海带发酵液中添加一水硫酸锌40g和四水合七钼酸铵3g制成，碳水化合物为果糖、复合肥中N/P/K＝15/15/15。[0062]水1000L，加入菌种、蟹粉、胶原蛋白、NaCl鼓泡通气进行培养，培养温度保持在28℃，培养时间为4天；
[0063]在一次培养的基础上，加入氨基酸、碳水化合物、复合肥，继续鼓泡通气进行培养，培养温度保持在32℃，培养时间为3天，即得微生物制剂。[0064]实施例3
[0065]枯草芽孢杆菌0.5kg、苏云金芽孢杆菌0.5kg、地衣芽孢杆菌0.5kg、巨大芽孢杆菌0.5kg、蟹粉0.5kg、胶原蛋白0.05kg、NaCl 0.9kg、氨基酸2kg、碳水化合物3kg、复合肥3kg。[0066]其中，胶原蛋白为鱼皮胶原蛋白，氨基酸为每100mL海带发酵液中添加一水硫酸锌30g和四水合七钼酸铵2g制成，碳水化合物为蔗糖、复合肥中N/P/K＝15/15/15。[0067]水1000L，加入菌种、虾壳粉、胶原蛋白、NaCl鼓泡通气进行培养，培养温度保持在30℃，培养时间为3天；
[0068]在一次培养的基础上，加入氨基酸、碳水化合物、复合肥，继续鼓泡通气进行培养，培养温度保持在30℃，培养时间为4天，即得微生物制剂。[0069]实施例4
[0070]枯草芽孢杆菌0.3kg、苏云金芽孢杆菌0.2kg、地衣芽孢杆菌0.7kg、巨大芽孢杆菌0.3kg、虾蟹粉1kg、胶原蛋白0.05kg、NaCl 0.05kg、氨基酸7kg、碳水化合物10kg、复合肥5kg。
[0071]其中，胶原蛋白为鱼皮胶原蛋白，氨基酸为为每100mL海带发酵液中添加一水硫酸锌40g和四水合七钼酸铵1g制成，碳水化合物为葡萄糖、复合肥中N/P/K＝15/15/20。[0072]水1000L，加入菌种、蟹粉、胶原蛋白、NaCl鼓泡通气进行培养，培养温度保持在32℃，培养时间为4天；
[0073]在一次培养的基础上，加入氨基酸、碳水化合物、复合肥，继续鼓泡通气进行培养，培养温度保持在28℃，培养时间为4天，即得微生物制剂。[0074]实施例5
[0075]各实施例制得生物制剂，经检测，菌种密度如表1：[0076]表1各实施例菌种密度
[0077]
实施例1实施例2实施例3实施例4菌种密度(cfu/ml)1.3×10132.7×10111.9×10126.2×1011
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结果表明，本发明各实施例中提供的微生物制剂具有非常高的菌体密度。
[0079]实施例6
[0080]微生物菌肥对病原菌的抑制效果：
[0081]a.将实施例1～4制得的微生物制剂，分别以水稀释，调整菌体密度约为1×106cfu/ml，检测各制剂对常见病原菌的抑制作用。[0082]b.病原菌为尖孢镰刀菌，由CGMCC购得，用LB培养基(胰蛋白胨10g，酵母浸粉5g，NaCl 10g，1L水)28℃培养1天，用无菌水稀释至106cfu/mL，备用。。[0083]c.培养基为PDA培养基，由马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、1L水组成，pH＝6.5。[0084]观察菌肥对病原菌的抑制作用。[0085]试验方法：牛津杯法。
[0086]将已灭菌的PDA培养基加热到完全融化，倒在培养皿内，每皿15ml(下层)，待其凝固。以无菌操作在培养基表面垂直放上牛津杯(内径6mm、外径8mm、高10mm的圆形小管，管的两端要光滑)。此外，将融化的PDA培养基冷却到50℃左右混入1mL b中所得菌，将混有菌的培养基5ml加到已凝固的培养基上待凝固(上层)。在牛津杯中加入经稀释的各实施例制得的微生物制剂(牛津杯一般可以装240微升，勿使其外溢)。加满后置35℃培养过夜，观察结果。每组平行3次，取平均值。设无菌水为对照。[0087]其中，对实施例1～12的试验结果如下表：[0088]表2抑菌实验结果
[0089]
[0090]
结果显示，对照组均无抑菌圈，实验组所有抑菌圈均大于18mm，说明抑菌效果显著
(p<0.05)，各实施例提供的微生物制剂皆表现出高度抑菌作用。其中，实施例3和实施例4所得微生物制剂的抑菌效果显著优于实施例1和实施例2，说明枯草芽孢杆菌与苏云金芽孢杆菌配合产生了增效协同作用，从而使对病原菌的抑制作用得到了显著提高(p<0.05)。[0091]实施例7～10[0092]配方如表3：
[0093]表3微生物菌剂组分
[0094]
微生物制剂水表面活性剂实施例7实施例1制剂1L10L皂角提取液15g实施例8实施例2制剂1L1L甜菜碱6mL实施例9实施例3制剂1L5L无患子提取液10mL实施例10实施例4制剂1L5L无患子提取液10mL[0095]微生物制剂稀释1～10倍后，与表面活性剂混合，制得微生物菌剂。
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实施例11
[0097]作为常用中药、又是贵重中药的人参，既可用于药品、又可用于保健品和食品，绝大多数是通过栽培获得的。[0098]人参是多年生植物，并且忌地性极强，不能重茬连作，用重茬地继续栽种人参一般在第2年以后存苗率降至30％以下，且存活的人参大多存在病虫害，甚至有的地块几乎会全部绝苗，目前发生机制尚不完全清楚。现在人参轮作间隔一般是20年以上，所以在栽培方面连作障碍是最大的技术难题。
[0099]本发明选择人参连作3年的土地，同一地块随机选取8块9m×9m的样方，常规翻耕、施底肥后，根灌不同受试样品，然后栽种人参，之后根据需要(根据所需补充水分的情况)每7～30天根灌或喷洒依次；另设给予等量清水处理作为对照组。实验组和对照组各种植100棵人参苗，一字排开，相间排列，在相同湿度、温度、光照条件下，观察2年，结果如表4、表5：[0100]表4：各组土壤微量元素含量
[0101]
[0102]
其他实施例施用后土壤微量元素含量均高于以仅给予等量水的对照组，结果与实施例1相似。[0103]表5：各组发病率(人参根腐病)
[0104]
发病率(％)实施例1制剂28％实施例2制剂30％实施例3制剂20％实施例4制剂24％实施例7菌剂18％实施例8菌剂14％实施例9菌剂17％实施例10菌剂19％水43％[0105]实施例12
[0106]三七药用植物为我国特有的名贵中药材，具有增强免疫力、抗疲劳、保护心肌细胞、抑制细胞凋亡、健胃、抗炎、散瘀、止血等多种功效，在人类保健和治疗上应用广泛，具有极高的药用和经济价值。目前，野生的三七已十分罕见，医药和食品市场上的绝大多数三七来源于人工栽培。三七和三七的人工种植和栽培分别位于我国的东北和西南各省。近年来，仅吉林省长白县和云南省文山州两地的三七种植面积在全盛时期超过50 000亩(35,000,000m2)，不仅供应国内市场，还大量出口，产量不足以满足市场需求。由于连年大面积单一种植，加之三七属于宿根的多年生植物，且喜温暖潮湿，忌地性极强，存在极其严重的连作
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障碍问题。三七经过一茬栽种之后，阔叶林皆伐后的土壤在30～50年内难以恢复，形成俗称“老地”的弃地。老地栽三七一般3年后的存苗率在25％以下，75％以上的三七苗皆因三七根腐烂而丢失。而剩余的三七根布满病疤，周皮变红，须根脱落，烧须严重。[0107]本发明选择三七连作3年的土地，同一地块随机选取8块9m×9m的样方，常规翻耕、施底肥后，根灌不同受试样品，然后栽种三七，之后根据需要(根据所需补充水分的情况)每7～30天根灌或喷洒依次；另设给予等量清水处理作为对照组。实验组和对照组各种植100棵三七苗，一字排开，相间排列，在相同湿度、温度、光照条件下，观察2年，结果如表6、表7：[0108]表6：各组土壤微量元素含量
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其他实施例施用后土壤微量元素含量均高于以仅给予等量水的对照组，结果与实施例1相似。[0111]表7：各组发病率(三七根腐病)
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结果表明，给予本发明提供的微生物制剂或微生物菌剂皆能够提高土壤中微量元素的含量，降低作物的发病率。相对于给予实施例1～4提供的微生物制剂，给予实施例7～10提供的菌剂的效果更佳(p<0.05)，说明表面活性剂的添加对效果的提高起到了重要的作用。以枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌共同发酵制备的菌剂或制剂的效果皆显著高于(p<0.05)单独使用枯草芽孢杆菌发酵制得的产品，说明3种菌种复配起到了良好的增效协同作用，从而使对土壤改良的效果得到提高而对连作导致作物病害情况得到明显的抑制。
[0115]后经过在全国各地不同地试验，得出本发明复配天然表面活性剂的微生物菌肥对
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防治作物土传病害、改善土壤微环境、提高作物品质、增加产量方面有明显的效果，本发明绿色环保无残留，对环境友好。
[0116]以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
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