一、判断题（10道）
( )1.组成蛋白质的20种氨基酸，它们至少含有一个不对称碳原子。
( 为L-型。( ( ( ( ( ( ( ( ( ) 2.氨基酸立体异构体虽有D-型和L-型之分，但在蛋白质中所发现的氨基酸均) 3.等摩尔的D-Alala和L-Ala混合液，不能引起偏振光平面的偏转。
)4.从蛋白质酸水解液中可以得到所有20种天然氨基酸。
) 5.氨基酸在水溶液或固体状态是以两性离子形式存在的。
)6.所有氨基酸都具有旋光性。
)7.构成蛋白质的20种氨基酸都是必需氨基酸。
) 8.多数氨基酸有D-和L-两种不同构型，而构型的改变涉及共价键的破裂。
)9.一氨基一羧基氨基酸的pI为中性，因为-COOH和-NH2 的解离度相同。
)10.在pH呈碱性的溶液中，氨基酸大多以阳离子形式存在。
)11.一蛋白质样品经酸水解后，能准确测定它的所有氨基酸。
二、选择题（20-30道）
１.在生理ＰH条件下，带正电荷的氨基酸是：( )
A.Ala B.Try C.Trp D.Lys
2.下列哪些氨基酸只含非必须氨基酸：( )
A.芳香族氨基酸 B.碱性氨基酸 D.支链氨基酸
3.pI在pH7附近的AA是：( )
A.Ser B.Glu D.His
4.下列含有两个羧基的氨基酸是：( )
A.精氨酸 B.赖氨酸 C.甘氨酸 D.色氨酸 E.谷氨酸
5.蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？( )
A.半胱氨酸 B.蛋氨酸 C.胱氨酸 D.丝氨酸 E.瓜氨酸
6.下列哪些不是碱性氨基酸：( )
C.酸性氨基酸 C.Asn A.组氨酸 B.蛋氨酸 C.精氨酸 D.赖氨酸
7.不属于芳香族氨基酸是：( )
A.苯丙氨酸 B.酪氨酸 C.色氨酸 D.脯氨酸
8.在生理pH条件下，下列哪种氨基酸带正电荷？( )
A.丙氨酸 B.酪氨酸 C.赖氨酸
D.蛋氨酸 E.异亮氨酸
9.下列氨基酸中哪一种是非必需氨基酸？( )
A.亮氨酸 B.酪氨酸 C.赖氨酸
D.蛋氨酸 E.苏氨酸
10.蛋白质的组成成分中，在280nm处有最大吸收值的最主要成分是：( )
A.酪氨酸的酚环 B.半胱氨酸的硫原子 C.肽键 D.苯丙氨酸
11.下列4种氨基酸中哪个有碱性侧链？( )
A.脯氨酸 B.苯丙氨酸 C.异亮氨酸 D.赖氨酸
12.下列哪种氨基酸属于亚氨基酸？( )
A.丝氨酸 B.脯氨酸 C.亮氨酸 D.组氨酸
13.下列氨基酸中哪一种不具有旋光性？( )
A.Leu B.Ala D.Ser E.Val
14.下列哪种酶作用于由碱性氨基酸的羧基形成的肽键？( A.糜蛋白酶 B.羧肽酶 D.胰蛋白酶
15.组成蛋白质的氨基酸基本上有多少种( )
A.300 C.20 D.10 E.5
16.氨基酸的平均分子量是( )
A.1000 B.500 D.100 E.80
17.组成蛋白质的酸性氨基酸有几种( )
)
C.Gly C.氨肽酶 B.30 C.110 A.2 B.3 C.5 D.10 E.20
18.组成蛋白质的碱性氨基酸有几种( )
A.2 B.3 C.5 D.10 E.20
19.组成蛋白质中的含巯基氨基酸是( )
A.酪氨酸 B.缬氨酸 D.胱氨酸 E.半胱氨酸
20.蛋白质分子中属于亚氨基酸的是( )
A.脯氨酸 B.甘氨酸 D.组氨酸 E.天冬氨酸
21.组成蛋白质的氨基酸在自然界存在什么差异( )
A.种族差异 B.个体差异 E.无差异
22.精氨酸与赖氨酸属于哪一类氨基酸( )
A.酸性 B.碱性 C.中性极性 C.谷氨酸 C.丙氨酸 C.组织差异 D.器官差异 D.中性非极性 E.芳
香族
23.细胞内含量最多的有机成分为( )
A.蛋白质 B.核酸 C.糖 D.脂类 E.酶
24.中性氨基酸的等电点一般为( )
A.7 B.略>7 C.略<7 D.>7 E.<7
25.氨基酸的紫外吸收峰一般在什么波长（nm）. ( )
A.<260 B.260 C.280 D.300 E.>300
三、填空题（10空）
1.组成蛋白质的氨基酸有20种，其中，必须氨基酸有 种，即
。
2.通用氨基酸除 外都有旋光性； 和 分子量比较小而且不合硫，在折叠的多肽链中能形成氢键； 在稳定许多蛋白质结构中起重要作用，因为它可参与形成链内和链间的共价键。 具有非极性侧链且是生成酪氨酸的前体。
3.氨基酸结构上的共同点是：(1) ,(2) ，(3) 。
四、问答题（5道）
1.将固体氨基酸溶于pH7的水中所得的氨基酸溶液，有的pH大于7，有的小于7，这种现象说明什么?
2.某氨基酸的水溶液pH值为6.0，问此氨基酸的等电点是大于6，等于6，还是小于6？
3.苯丙氨酸在水中的溶解度很低,而丝氨酸却易溶于水.为什么?
4.计算（1）谷氨酸（2）精氨酸和（丙氨酸）的等电点。
5.蛋白质有哪些重要功能？
第四章
一、判断题（10道）
( )1.内部氢键的形成的是驱使蛋白质折叠的主要力量。
( )2.天然蛋白质中多肽链的螺旋构象都是右旋的。
( ) 3.蛋白质构象的变化伴随自由能的变化，最稳定的构象自由能最低。
( ) 4.刚性平面结构的肽单位是蛋白质主链骨架的重复单位。
( ) 5.脯氨酸不能维持α—螺旋，凡有脯氨酸的部位肽链都发生弯转。
( ) 6.因为羧基碳和亚氨基氮之间的部分双键性质，所以肽键不能自由旋转。
( )7.α-碳和羧基碳之间的键不能自由旋转。
( )8.蛋白质的变性是蛋白质立体结构的破坏，因此涉及肽键的断裂。
( ) 9.蛋白质是两性电解质，它的酸碱性质主要取决于肽链上可解离的R基团。
( ) 10．多数氨基酸有D-和L-两种不同构型，而构型的改变涉及共价键的破裂。
( )11.变性后的蛋白质，分子量不发生变化。
二、选择题（20-30道）
1.以下叙述哪些是错误的：( )
A 肽键中的C－N具有部分双键性质；
B 肽单位中的六个原子处在一个平面上；
C 两个相邻近的α－碳呈反式分布；
D α－C的二面角在0～180°内可以自由旋转。
2.蛋白质空间结构稳定机制中，包括下列哪种氨基酸与赖氨酸残基的相互作用。( )
A G1u B Arg C His D Asp
3.测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g，此样品约含蛋白质多少？( )
A.2．00g B.2．50g C.6．40g D.3．00g E.6．25g
4.蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定：( )
A.溶液pH值大于pI B.溶液pH值小于pI C.溶液pH值等于pI
D.溶液pH值等于7.4 E.在水溶液中
5.下列哪种蛋白质在pH5的溶液中不带正电荷？( )
A.pI为4．5的蛋白质 B.pI为7．4的蛋白质
C.pI为7的蛋白质 D.pI为6．5的蛋白质
6.下列哪一项不是蛋白质的性质之一？( )
A.处于等电状态时溶解度最小 B.加入少量中性盐溶解度增加
C.变性蛋白质的溶解度增加 D.有紫外吸收特性
7.下列有关蛋白质的叙述哪项是正确的？( )
A.蛋白质分子的净电荷为零时的pH值是它的等电点
B.大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出
C.由于蛋白质在等电点时溶解度最大，所以沉淀蛋白质时应远离等电点
D.以上各项均不正确
8.氨基酸在等电点时具有的特点是：( )
A.不带正电荷 B.不带负电荷
C.A和B D.溶解度最大 E.在电场中不泳动
9.蛋白质的一级结构是指：( )
A.蛋白质氨基酸的种类和数目 B.蛋白质中氨基酸的排列顺序
C.蛋白质分子中多肽链的折叠和盘绕 D.包括A,B和C
10.蛋白质元素组成的特点是含有的16%相对恒定量的是什么元素( )
A.C B.N C.H D.O E.S
11.组成蛋白质的氨基酸之间分子结构的不同在于其( )
A.Cα B.Cα-H C.Cα-COOH D.Cα-R E.Cα-NH2
12.氨基酸间脱水的产物首先产生小分子化合物为( )
A.蛋白质 B.肽 C.核酸 D.多糖 E.脂肪
13.人体内的肽大多是( )
A.开链 B.环状 C.分支 D.多末端 E.单末端链，余为环状
14.谷胱甘肽是由几个氨基酸残基组成的小肽( )
A.2 B.3 C.9 D.10 E.39
15.Sanger测出的第一条蛋白质分子的一级结构是什么( )
A.胰高血糖素 B.胰岛素 C.血浆白蛋白 D.血浆免疫球蛋白 E.血红蛋白
16.蛋白质的紫外吸收峰280主要是由于含有以下什么氨基酸( )
A.色氨酸 B.谷氨酸 C.苯丙氨酸 D.天冬氨酸 E.组氨酸
17.以下那种蛋白质是结合蛋白质( )
A.谷蛋白 B.白蛋白 C.硬蛋白 D.糖蛋白 E.组蛋白
18.体内蛋白质分子中的胱氨酸是由什么氨基酸转变生成( )
A.谷氨酸 B.精氨酸 C.组氨酸 D.半胱氨酸 E.丙氨酸
19.将甘氨酸和丙氨酸混合，在一定条件下发生二分子缩合反应，生成的二肽化合物共有( )
A、2种 B、3种 C、4种 D、5种
20.下列叙述中不属于蛋白质一般结构内容的是( )
A、多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序
B、多肽链中氨基酸残基的键链方式
C、多肽链中主肽链的空间走向，如a-螺旋
D、胰岛分子中A链与B链间含有两条二硫键，分别是A7-S-S-B7，A20-S-S-B19
三、填空题（10空）
1.在蛋白质一级结构测定中，常用来做N－端分析的方法有 , 和 三种。
2.有一蛋白质经末端分析知道有两个N－末端，SDS电泳均显示两条带，说明该蛋白质含有 亚基，另一种蛋白质分子用羟基乙醇处理，在酸性碱性条件下均显示一条带，说明该蛋白质分子的结构特点是 。
3.在正常生理条件下(pH＝7)，蛋白质分子中 和 的侧链部分带正电荷。
4.用紫外光吸收法测定蛋白质含量的依据是所有的蛋白质分子中都含有 、
和 三种氨基酸。
5. 1965年中国科学家完成了由51个氨基酸残基组成的 合成。
6.组成蛋白质的主要元素有_________，________，_________，_________。
7.不同蛋白质的含________量颇为相近，平均含量为________%。
8.蛋白质具有两性电离性质，大多数在酸性溶液中带________电荷，在碱性溶液中带_______电荷。当蛋白质处在某一pH值溶液中时，它所带的正负电荷数相待，此时的蛋白
质成为 _________，该溶液的pH值称为蛋白质的_________。
9.蛋白质的一级结构是指_________在蛋白质多肽链中的_________。
10.在蛋白质分子中，一个氨基酸的α碳原子上的_______与另一个氨基酸α碳原子上的______脱去一分子水形成的键叫______，它是蛋白质分子中的基本结构键。
四、问答题（5道）
1.根据下列信息推断含等量Met，Phe，Asp，Ser，Thr的五肽序列：
(1)用BrCN处理五肽，释放出肽段和一个游离的高丝氨酸；
(2)用胰凝乳蛋白酶处理五肽得到两个碎片，酸性较强的碎片含甲硫氨酸；
(3)用羧肽酶A处理五肽，迅速放出Ser，随后放出Thr。
2. 下列每对多肽中哪种在水中的溶解性大？
(1) 在pH7.0，(Gly)20和(Glu)20
(2) 在pH7.0，(Lys-Ala)3和(Phe-Met)3
(3) 在pH9.0，(Ala-Ser-gly)5和(Asn-Ser-His)5
(4) 在pH3.0，(Ala-Ser-gly)5和(Asn-Ser-His)5
(5) (Phe)20和(Gly)20
(6) (Phe)20和(Tyr)20
(7) (Glu)20和Asp)20
3.多肽：
gly-Trp-Pro-Leu-Lys-Cys-Gly-Phe-Ala-His-Mert-Val-glu-Lys-Pro-Asp-Ala-
Tyr-Gln-Met-Arg-Ser-Thr-Ala-phe-Gly-gly 分别用（1）胰蛋白酶、（2）胰凝乳蛋白酶、（3）CNBr和（4）V8蛋白酶处理时产生什么样的片段？
4.根据蛋白质一级氨基酸序列可以预测蛋白质的空间结构。假设有下列氨基酸序列（如图）：
1 5 10 15 20
Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln-Pro-Asp-Gly-
25 27
Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg
（1）预测在该序列的哪一部位可能会出弯或β-转角。
（2）何处可能形成链内二硫键？
（3）假设该序列只是大的球蛋白的一部分，下面氨基酸残基中哪些可能分布在蛋白的外表面，哪些分布在内部？
天冬氨酸；异亮氨酸；苏氨酸；缬氨酸；谷氨酰胺；赖氨酸
5.什么是蛋白质的一级结构？为什么说蛋白质的一级结构决定其空间结构？
第五章
一、判断题（10道）
(√ )1.原来溶于水的蛋白质，经加热后从水中析出主要是因为蛋白质的空间结构破坏，原来位于分子内部的疏水氨基酸外露的结果。
(× )2.蛋白质分子的亚基就是蛋白质的结构域。
(√ ) 3.蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序在很大程度上决定了它的构象。
(√) 4.蛋白质是生物大分子，但并不都具有四级结构。
(√ ) 5.并非所有构成蛋白质的20种氨基酸的α-碳原子上都有一个自由羧基和一个自由氨基。
(√ ) 6.在具有四级结构的蛋白质分子中，每个具有三级结构的多肽链是一个亚基。
(×) 7.蛋白质的空间结构就是它的三级结构。
(×) 8.维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。
(× )9.具有四级结构的蛋白质，它的每个亚基单独存在时仍能保存蛋白质原有的生物活性。
(×)10.变性蛋白质的溶解度降低，是由于中和了蛋白质分子表面的电荷及破 坏了外层的水膜所引起的。
(×)11.蛋白质二级结构的稳定性是靠链内氢键维持的，肽链上每个肽键都参与氢键的形成。
( ′ )12.推动蛋白质的四级结构形成的力是氢键作用。
二、选择题（20-30道）
1.蛋白质在280nm有最大光吸收，主要是因为其中含有：B
A. Phe B.Tyr C.His D.Trp
2.下列哪种蛋白质含有三股螺旋：A
A.α－角蛋白 B.血红蛋白 C.胶原蛋白 D.丝心蛋白
3.维持蛋白质空间结构稳定的主要因素是：A
A.疏水作用 B.氢键 C. 盐键 D. 范德华作用力
4.胶原蛋白中含量最多的氨基酸是：B
A.甘氨酸和丙氨酸 B.脯氨酸和羟脯氨酸
C.谷氨酸和天冬氨酸 D.精氨酸和赖氨酸
5.维持蛋白质二级结构的主要化学键是：D
A.盐键 B.疏水键 C.肽键 E.二硫键
6.关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是：B
A.天然蛋白质分子均有的这种结构
B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性
C.三级结构的稳定性主要是次级键维系
D.亲水基团聚集在三级结构的表面
氢键 D. E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基
7.具有四级结构的蛋白质特征是：E
A.分子中必定含有辅基
B.在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上，肽链进一步折叠，盘曲形成
C.每条多肽链都具有独立的生物学活性
D.依赖肽键维系四级结构的稳定性
E.由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成
8.蛋白质变性是由于：D
A.氨基酸排列顺序的改变 B.氨基酸组成的改变 C.肽键的断裂
D.蛋白质空间构象的破坏 E.蛋白质的水解
9.变性蛋白质的主要特点是：D
A.粘度下降 B.溶解度增加 C.不易被蛋白酶水解
D.生物学活性丧失 E.容易被盐析出现沉淀
10.关于α-螺旋错误的是：C
A.螺旋中每3.6个氨基酸残基为一周 B.为右手螺旋结构
C.两螺旋之间借二硫键维持其稳定 D.氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧
11.下列关于β-片层结构的论述哪些是错误的：D
A.是一种伸展的肽链结构 B.也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成
C.肽键平面折叠成锯齿状 D.两链间形成离子键以使结构稳定
12维持蛋白质三级结构的主要键不包括：A
A.肽键 B.疏水键 C.离子键 D.范德华引力
13.下列哪一项不是蛋白质α-螺旋结构的特点？B
A.天然蛋白质多为右手螺旋
B.肽链平面充分伸展
C.每隔3.6个氨基酸螺旋上升一圈。
D.每个氨基酸残基上升高度为0.15nm.
14.下列关于蛋白质结构的叙述，哪一项是错误的？A
A.氨基酸的疏水侧链很少埋在分子的中心部位
B.电荷的氨基酸侧链常在分子的外侧，面向水相
C.白质的一级结构在决定高级结构方面是重要因素之一
D.白质的空间结构主要靠次级键维持
15.列哪些因素妨碍蛋白质形成α-螺旋结构？E
A.脯氨酸的存在 B.氨基酸残基的大的支链
C.性氨基酸的相邻存在 D.性氨基酸的相邻存在
E.以上各项都是
16.于β-折叠片的叙述，下列哪项是错误的？C
A.β-折叠片的肽链处于曲折的伸展状态
B.的结构是借助于链内氢键稳定的
C.有的β-折叠片结构都是通过几段肽链平行排列而形成的
D.基酸之间的轴距为0.35nm
17.持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是：C
A.盐键 B.疏水键 C.氢键 18.维持蛋白质三级结构稳定的因素是：E
A.肽键 B.二硫键 C.离子键 E.次级键
19.一般蛋白质空间结构分成几个层次D
A.1 B.2 C.3 D.4 20.维持蛋白质α-螺旋的化学键主要是D
A.肽键 B.二硫键 C.盐键 D.氢键 21.血红蛋白四级结构亚基间连接主要是B
A.H键 B.盐键 C.疏水键 D.肽键 22.稳定蛋白质三级结构形成分子内核的连接键是C
二硫键
D.氢键 E.5
E.疏水键
E.范德华力
D. A.H键 B.盐键 C.疏水键 D.肽键 E.范德华力
23.肽键与氢键的键能相比是A
A.大 B.小 C.相同 D.略大 E.略小
24.变构作用发生在具有几级结构的蛋白质分子上E
A.一级 B.二级 C.超二级 D.三级 E.四级
25.蛋白质变性时除生物活性丧失外重要改变是A
A.溶解度↓ B.溶解度↑ C.紫外吸收值↑ D.紫外吸收值↓ E.两性解离↑
三、填空题（10空）
1.蛋白质的主链构象单元有 ， ， ， 四种。
α-螺旋，β-折叠，β-转角，松散片段
2.在典型的α－螺旋结构中，一个氨基酸的氨基氢与其前面第 个氨基酸残基的羰基氧形成氢键，在此封闭体系内，共含有 个主链原子。3.6,13
3.目前己知的超二级结构有 、 、 和 四种基本形式。α-螺旋超螺旋、βXβ、β-迂回、β-折叠桶
4.维持蛋白质三级结构的作用力是 ， ， 和盐键。
疏水力，范德华力，氢键
5.胶原蛋白的基本组成单位是由 组成的原胶原蛋白，再经多次聚合形 。原胶原蛋白分子，胶原纤维
6蛋白质变性主要是因为破坏了维持和稳定其空间构象的各种_________键，使天然蛋白质原有的________与________性质改变。次级键 物理化学 生物学
7.按照分子形状分类，蛋白质分子形状的长短轴之比小于10的称为_______，蛋白质分子形状的长短轴之比大于10的称为_________。按照组成分分类，分子组成中仅含氨基酸的称_______，分子组成中除了蛋白质部分还分非蛋白质部分的称_________，其中非蛋白质部分称_________。球状蛋白质 纤维状蛋白质 单纯蛋白质 结合蛋白质 辅基
四、问答题（5道）
1.什么是蛋白质的一、二、三、四级结构？主要的稳定因素各是什么？
（一）蛋白质的一级结构
根据1969年国际理论化学和应用化学协会（IUPAC）的规定蛋白质的一级结构（Primary structure）是指蛋白质分子中氨基酸的排列顺序。
氨基酸与氨基酸之间通过酰胺键相连构成的化合物称为肽或蛋白质，通常构成肽链的氨基酸数目在10个以下的称为寡肽，10以上者称为多肽或蛋白质。
蛋白质与多肽链的区别：
（1）氨基酸组成数量。一般都在100个以上，分子量在10，000以上。
（2）具有特定的空间结构。
（3）结构与功能之间的对应关系。
（二）蛋白质的二级结构
蛋白质多肽链主链本身、局部的、有规则的空间排布方式——蛋白质的二级结构。蛋白质的二级结构主要包括a-螺旋结构、b-折叠、b-转角、无规则卷曲（自由回转）
1、蛋白质二级结构的主要类型
a-螺旋结构是美国麻省理工学院的Pauling、 Corey 在 1953 年对动物毛发结构的X- 光衍射分析中发现的一种蛋白结构， a- 螺旋结构有左旋和右旋两种。 ①多肽链主链围绕其中心轴盘绕而成的一种螺旋管状结构，螺旋结构每螺旋上升一圈需要3.6个氨基酸残基，垂直上升0.54nm；②螺旋结构中每个氨基酸残基上的氨基氢与其后第四个氨基酸残基的羰基氧形成氢键，其氢键的走向与螺旋轴平行。
b-折叠结构也是Pauling和Corey在蚕丝丝心蛋白中发现的一种蛋白结构。 ① b-折叠结构是由几条多肽链或一条多肽链的几个片段平行折叠形成的一种片层结构；②相邻的主链之间借助于链内或链间氢链相连形成片层，主链中相邻氨基酸残基的侧链基团上下交替排列在片层的上方或下方；③b-折叠结构分平行或反平行两种结构。
b- 转角是指多肽链走向发生180°回折，其转角处的结构。
无规则卷曲（自由回转）
2、超二级结构与结构域
（1）超二级结构（Supersecodary structure）是指由两个或多个二级结构单元被长度不等，走向不规则的连接肽彼此相连，形成的有规律的、在空间上可以辨认的二级结构组合体称为超二级结构。超二级结构根据其复杂程度分为简单超二级结构和复杂超二级结构两种类型。
由两个或少数构象单元经连接肽相连形成的超二级结构称简单超二级结构，一般包括a-a corner）、a-发夹 （a-hairpin）、 b-发夹（b-hairpin）、拱形结构（arch）。
由多个构象单元或由简单的超二级结构进一步组合形成的有规律的在空间上可辩识的结构，具体可分为a-螺旋超螺旋、 bXb结构、 b-迂回、 b-折叠桶四种形式。
（2）结构域（Structural domain）
也叫辖区，是指存在于球状蛋白质分子内部由相邻的多个二级结构单元彼此相连形成的球状亚单位。结构域是独立的结构单位、功能单位和独立的结构形成单位。结构域主要包括a-结构域、b-折叠域、a+b 结构域和a/b 结构域。
结构域作为独立的结构单位，具有内在的稳定性，结构域之间通过柔性肽段相连。多数蛋白质具有多个结构域，其结构域可能相同，如磷酸丙糖异构酶具有两个相似的结构域，也可能不同，如丙酮酸激酶。
（三）蛋白质的三级结构
在二级结构的基础上，多肽链进一步盘绕折叠形成的球状蛋白质结构称为蛋白质的三级结构。换言之是指构成球状蛋白质的多肽链中所有原子和基团的空间排布。它是由不同的二级结构单元按照一定的方式彼此组合而成的一种蛋白质结构。
（四）蛋白质的四级结构
由两个及其以上具有三级结构的多肽链链相互聚集形成的蛋白质空间结构称为蛋白质四级结构。四级结构形成的意义：①四级结构赋予蛋白质更加复杂的结构，以便执行更复杂的功能如在酶类中，除功能简单的水解酶，其它酶大多数是寡聚蛋白。②通过亚基间的相互作用，可以对酶或其它功能蛋白的活性进行调节。③催化相关代谢的酶形成多酶复合物，可以提高酶促反应的速度。④可以得用大小、种类有限的亚基组合成结构复杂的大分子蛋白质。⑤可以降低细胞内的渗透压。⑥节约编码的信息量。
(五)维持蛋白质空间构象的作用力
在不同蛋白质结构中起主要作用的稳定因素不同，在蛋白质一级结构中起主要稳定作用的因素是共价键；在蛋白质二级结构中起主要作用的稳定因素是氢键；在蛋白质三、四级结构中起最主要作用的因素是疏水力。
2. 许多蛋白质在280nm处具有很强的紫外吸收，但明胶例外，为什么？
解答；许多蛋白质在280nm处具有芳香环侧链的氨基酸残基，如色氨酸和苯丙氨酸，而使其具有紫外吸收能力。白明胶系胶原蛋白的部分降解产物 胶原蛋白具有特殊的氨基酸
组成，含芳香环的氨基酸比例太低，因而明胶蛋白溶液在280nm处不具吸收能力。
3. 蛋白质的α—螺旋结构有何特点？
答：（1）多肽链主链绕中心轴旋转，形成棒状螺旋结构，每个螺旋含有3.6个氨基酸残基，螺距为0.54nm,氨基酸之间的轴心距为0.15nm.。
（2）α-螺旋结构的稳定主要靠链内氢键，每个氨基酸的N—H与前面第四个氨基酸的C＝O 形成氢键。
（3）天然蛋白质的α-螺旋结构大都为右手螺旋。
4. 蛋白质的β—折叠结构有何特点？
答：β-折叠结构又称为β-片层结构，它是肽链主链或某一肽段的一种相当伸展的结构，多肽链呈扇面状折叠。
（1）两条或多条几乎完全伸展的多肽链（或肽段）侧向聚集在一起，通过相邻肽链主链上的氨基和羰基之间形成的氢键连接成片层结构并维持结构的稳定。
（2）氨基酸之间的轴心距为0.35nm（反平行式）和0.325nm（平行式）。
（3）β-折叠结构有平行排列和反平行排列两种。
第六章
一、判断题（10道）
( )1.SDS－聚丙烯酰胺电泳测定白质分子量的方法是根椐蛋白质所带电荷的不同。
( )2.某一蛋白质样品，当其酸性氨基酸数目等于碱性氨基酸数目时，此蛋白质样品的等电点pH是7。
( )3.用层析技术分离氨基酸是根据各种氨基酸的极性不同。
( )4.用凝胶电泳技术分离蛋白质是根据各种蛋白质的分子大小和电荷不同。
( )5.从细胞内提取出某种物质，用羧肽酶A不能使其水解，与茚三酮反应呈阴性，因此可以肯定地判断它是非肽物质。
( )6.有机溶剂引起蛋白质变性的主要原因之一是降低介质的介电常数。
( )7.利用盐浓度的不同可以提高或降低蛋白质的溶解度。
( )8.氨基酸与茚三酮反应都产生蓝紫色化合物。
( )9..用FDNB法和Edman降解法测定蛋白质多肽链N-端氨基酸的原理是相同的。
( )10.所有的肽和蛋白质都能和硫酸铜的碱性溶液发生双缩尿反应。
( )11.盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离制备。
二、选择题（20-30道）
1.茚三酮与脯氨酸反应时，在滤纸层析谱上呈现：( )
A.蓝紫色 B.红色 C.黄色 D.绿色
2.若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时，该溶液的pH值应为：( )
A.8 B.＞8 C.＜8 D.≤8 E.≥8
3.变性蛋白质不具有的特性：( )
A.溶解度显著下降 B.生物学活性丧失 C.易被蛋白酶水解 D.凝固或沉淀
4.在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？( )
A.凯氏定氮法 B.双缩尿反应 C.紫外吸收法 D.茚三酮法
5.凝胶过滤法分离蛋白质时，从层析柱上先被洗脱下来的是：( )
A.分子量大的 B.分子量小的
C.电荷多的 D.带电荷少的
6.下列哪个性质是氨基酸和蛋白质所共有的？( )
A.胶体性质 B.两性性质
C.沉淀反应 D.变性性质 E.双缩脲反应
7.为鉴别某种白色纺织品的成分是蚕丝还是合成纤维，可选用的简单、适宜的方法是( )
A、滴加浓H2SO4 B、灼烧线头 C、用手摩擦凭手感 D、滴加浓硝酸
8.能使蛋白质从溶液中析出，又不使蛋白质变性的方法是( )
A、加饱和硫酸钠溶液 B、加福尔马林 C、加75%的酒精 D、加氯化钡溶液
9.在①小苏打、②纯碱、③氧化铝、④丙氨酸、⑤硫化铵五种化合物中，既能与盐酸反应，又能与氢氧化钠反应的是( )
A、③④ B、③④⑤ C、①②③④ D、①③④⑤
10.下列关于蛋白质的叙述中，正确的是( )
A、蛋白质溶液中加入饱和(NH4)2SO4溶液，蛋白质析出，若再加水也不会溶解。
B、重金属盐能使蛋白质变性，所以吞服“钡餐”会引起中毒。
C、浓硝酸溅在皮肤上呈黄色，是由于蛋白质和浓硝酸发生了颜色反应
D、蚕丝在氧气中充分燃烧后，只生成CO2和H2O
11.下列哪种试剂可使蛋白质的二硫键打开? ( )
A、溴化氰 B、b-巯基乙醇 C、碘乙酸氟苯
12.下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时，最先被洗脱的是( )
A、Mb（Mr：68500）
B、血清清蛋白（Mr：68500）
C、牛νˉ乳球蛋白（Mr：35000）
D、马肝过氧化氢酶（Mr：247500）
E、牛胰岛素（Mr：5700）
13.分子筛（凝胶层析）分离蛋白质的依据是( )
A、蛋白质紫外吸收的最大波长280nm
、2,4-二硝基 DB、蛋白质是两性电解质
C、蛋白质分子大小不同
D、蛋白质多肽链中氨基酸是借肽键相连
E、蛋白质溶液为亲水胶体
14.电泳分离蛋白质的依据是( )
A、蛋白质紫外吸收的最大波长280nm
B、蛋白质是两性电解质
C、蛋白质分子大小不同
D、蛋白质多肽链中氨基酸是借肽键相连
E、蛋白质溶液为亲水胶体
15.分光光度测定蛋白质含量的依据是( A、蛋白质紫外吸收的最大波长280nm
B、蛋白质是两性电解质
)
C、蛋白质分子大小不同
D、蛋白质多肽链中氨基酸是借肽键相连
E、蛋白质溶液为亲水胶体
16.磺胺药抑菌机制不正确是( )
A、增加二氢叶酸合成酶活性
B、抑制细菌核酸合成
C、磺胺药与对氨基苯甲酸具有类似结构
D、磺胺药属酶的竞争性抑制剂
E、药物可致四氢叶酸合成障碍
17.氨基酸不具有的化学反应是：( )
A、肼反应 B、异硫氰酸苯酯反应 C、茚三酮反应 D、双缩脲反应
18.当层析系统为正丁醇∶冰醋酸∶水=4∶1∶5时，用纸层析法分离苯丙氨酸（F）、丙氨酸（A）和苏氨酸（T）时则它们的Rf值之间关系应为：( )
A、F＞A＞T B、F＞T＞A C、A＞F＞T D、T＞A＞F
19.氨基酸与亚硝酸反应所释放的N2气中，氨基酸的贡献是：( )
A、25% B、50% C、80% D、100%
20.寡肽或多肽测序时下列试剂中最好的是：( )
A、2，4-二硝基氟苯 B、肼 C、异硫氰酸苯酸 D、丹酰氯
三、填空题（10空）
1.盐浓度低时，盐的加入使蛋白质的溶解度 ，称为 现象；盐浓度高时，盐的加入使蛋白质的溶解度 ，称为 现象。
2.2，4—二硝基氟苯(DNFB或FDNB)与氨基酸作用可生成黄色的 ，简称 。
3.在pH6.0时将G1y，A1a，G1u，Lys，Arg和Ser的混合物进行纸电泳，向阳极移动 快的是 ；向阴极移动最快的是 和 ；移动很慢接近原点的是 ， 和 。
4.测定肽段常用的方法是Edman化学降解法，Edman试剂是 。苯异硫氰酸
5.去污剂如十二烷基磺酸钠(SDS)使蛋白质变性是由于SDS能破坏 使疏水基团暴露到介质中。
6.研究蛋白质构象的方法很多，但主要是应用 。X-光衍射分析技术
7.蛋白质颗粒表面的_______和________是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。
四、问答题（5道）
1指出用电泳技术分离下列物质，pH是多少时最合适?
(1) 血清清蛋白(pI＝4.9)和血红蛋白(pI＝6.8)；
(2) 肌红蛋白(pI＝7.0)和胰凝乳蛋白梅(pI＝9.5)；
(3) 卵清蛋白(pI＝4.6)、血清清蛋白和肽酶(pI＝5.0)。
2.下面哪种多肽在280nm具有更大的吸收？
3.什么是蛋白质的变性作用和复性作用？蛋白质变性后哪些性质会发生改变？
4.简述蛋白质变性作用的机制。
5.下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中：CNBr、异硫氰酸苯酯、丹黄酰氯、脲、6mol/L HCl、β-巯基乙醇、水合茚三酮、过甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。其中哪一个最适合完成以下各项任务？
（1）测定小肽的氨基酸序列。
（2）鉴定肽的氨基末端残基。
（3）不含二硫键的蛋白质的可逆变性；如有二硫键存在时还需加什么试剂？
（4）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。
（4）在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。
（5）在赖氨酸和精氨酸残基羧基侧水解肽键。
第七章
一、判断题（10道）
( )1.在外界环境一定的条件下，蛋白质的空间结构主要是由它的一级结构所决定的。
( )2.在胶原蛋白质中，由于组分中主要是甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸，它们在参于肽键形成后，不再含有可供形成氢键的氢原子，故不能形成α－螺旋，胶原蛋白中多肽链构象主要是β－折叠结构。
( )3.血红蛋白和细胞色素C都是含铁卟啉的色蛋白，两者的功能虽然不同，但它们的作用机制相同，都是通过铁离子化合价的变化来实现的。
( )4.血红蛋白比肌红蛋白携氧能力高，这是因为它有多个亚基。
( )5.蛋白质和酶原的激活过程说明蛋白质的一级结构变化与蛋白质的功能密切相关。
( )6.肌红蛋白和血红蛋白的α和β链有共同的三级结构。
( )7.所有的蛋白质都有酶活性。
( )8.血红蛋白和肌红蛋白都是氧的载体，前者是一个典型的变构蛋白，在与氧结合过程中呈现变构效应，而后者却不是。
( )9.一个蛋白质分子中有两个半胱氨酸存在时，它们之间可以形成两个二硫键。
( )10.蛋白质的亚基都是具有生物活性的多肽。
二、选择题（20-30道）
1.下列哪些蛋白质是不溶于水的？( )
A.血红蛋白 B.酶 C.抗体 D.胶原蛋白
2.细胞色素氧化酶除含有血色素辅基外，还含有：( )
A.铜 B.铁 C.镁 D.锌
3.在效应物作用下，蛋白质产生的变构(或别构)效应是由于蛋白质的( )
A.一级结构发生变化 B.构型发生变化
C.构象发生变化 D.氨基酸序列发生变化
4.下列具有协同效应的蛋白质是：( )
A.肌红蛋白 B.血红蛋白 C.丝心蛋白 D.弹性蛋白
5.同源蛋白是指：( )
A.来源相同的各种蛋白质 B.来源不同的同一种蛋白质
C.来源相同的同一种蛋白质 D.来源不同的各种蛋白质
6. 下列哪项与蛋白质的变性无关？( )
A. 肽键断裂 B.氢键被破坏 C.离子键被破坏 D.疏水键被破坏
7.蛋白质空间构象的特征主要取决于下列哪一项？( )
A.多肽链中氨基酸的排列顺序 B.次级键 C.链内及链间的二硫键 D.温度及pH
8.角蛋白分子中出现频率最高的二级结构是( )
A.α-螺旋 B.β-片层 C.π-螺旋 D.β-转角 E.随意弯曲
9.免疫球蛋白分子的三级结构类似什么形状( )
A.B字型 B.A字型 C.X字型 D.Y字型10.免疫球蛋白分子最高层次分子结构是( )
A.一级 B.二级 C.超二级 E.四级
11.一般蛋白质分子中二硫键断裂，生物活性变化是( )
A.升高 B.降低 C.不变 D.丧失 E.略有改变
12.肌红蛋白分子中比较多的二级结构是( )
A.α-螺旋 B.β-片层 C.β-转角 D.π-螺旋 E.随意弯曲
13.\"分子病\"首先是蛋白质什么基础层次结构的改变( )
A.一级 B.二级 C.超二级 D.三级 E.四级
14.镰刀型红细胞性贫血是哪种蛋白质结构的改变与异常( )
E.Z字型
D.三级 A.乳酸脱氢酶 B.淀粉酶 C.胰岛素 D.肌红蛋白 E.血红蛋白
15.HbA的α亚基与O2结合后产生变构效应，从而：( )
A、促进α-亚基与O2结合，抑制β-亚基与O2结合
B、抑制α-亚基与O2结合，促进β-亚基与O2结合
C、促进其他亚基与O2结合
D、促进α-亚基与O2结合，同时促进β-亚基与CO2结合
16.促进Hb转变为HbO2的因素是：( )
A、CO2分压增高 B、氧分压增高
C、血液〔H 〕增高 D、温度增加
E、血液pH下
17.下列有关Mb的叙述哪一项是不正确的：( )
A、Mb由一条多肽链和一个血红素结合而成
B、Mb具有8段αˉ螺旋结构
C、大部分疏水基团位于Mb球状结构的外部
D、血红素靠近F8组氨基酸残基附近
E、O2是结合在血红素的Fe2 上
18.免疫球蛋白包括如下五种：( )
A、IgG、IgA、IgM、IgD、和IgE
B、IgA、IgG、IgC、IgD和IgE
C、IgG、IgA、IgM、IgN和IgE
D、IgM、IgA、IgG、IgD和IgNXueHui.Com
E、IgE、IgA、IgD、IgB和IgG
19.Hb中一个亚基与其配体（O2）结合后，促使其构象发生变化，从而影响此寡聚体与另一亚基与配体的结合能力，此现象称为：( )
A、协同效应 B、共价修饰 C、化学修饰 D、激活效应 E、别构效应
20.一个蛋白质与它的配体（或其他蛋白质）结合后，蛋白质的构象发生变化，使它更适合于功能需要，这种变化称为：( )
A、协同效应 B、化学修饰 C、激活效应 D、共价修饰 E、别构效应
21.血红蛋白的氧合动力学曲线呈S形，这是由于：( )
A、氧可氧化Fe（Ⅱ），使之变为Fe（Ⅲ）
B、第一个亚基氧合后构象变化，引起其余亚基氧合能力增强
C、这是变构效应的显著特点，它有利于血红蛋白质执行输氧功能的发挥
D、亚基空间构象靠次级键维持，而亚基之间靠次级键缔合，构象易变
三、填空题（10空）
1.球蛋白分子中 基团排列在外部， 基团排列在分子的内部。
2.1953年英国科学家 等人首次完成牛胰岛素 的测定，证明牛胰岛素是由 条多肽链，共 个氨基酸组成。
3.镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子b亚基的第六位 氨酸被 氨酸所替代，前一种氨基酸为 性侧链氨基酸，后者为 性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。
4.细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是 、 。
四、问答题（5道）
1.什么是蛋白质的等电点(pI)?为什么说在等电点时蛋白质的溶解度最低?
2.用画图法比较肌红蛋白和血红蛋白氧合曲线的差异，并说明为什么? 2，3—二磷酸甘油酸(DPG)与血红蛋白对氧的亲和力有什么影响
3.举例说明蛋白质结构与功能的关系？
4.什么是蛋白质的空间结构？蛋白质的空间结构与其生物功能有何关系？
5.举例说明蛋白质的结构与其功能之间的关系。
2009-2010生化期中考
一、正误题（在题后的括号中打√或打×，每小题2分，共20分）
1.所有的蛋白质均由20种氨基酸组成。（ ）
2.蛋白质变性后的结果是溶解度降低。（ ）
3.血红蛋白是由两个α亚基和两个β亚基（α2β2）组成的。（ ）
4.蛋白质分子二级结构主要靠氢键维系。（ ）
5.酶和一般化学催化剂相比，仅仅是有更强的催化能力。（ ）
6. 不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而恢复酶活性称为酶的可逆抑制作用。（ ）
7. 镰刀型红细胞贫血病是一种先天遗传性的分子病，其病因是由于正常血红蛋白分子中的一个谷氨酸残基被缬氨酸残基所置换。（ ）
8. 绝大部分酶的化学本质是蛋白质。（ ）
9. 天然氨基酸都有一个不对称α-碳原子。（ ）
10.酶动力学主要是研究酶的最适作用温度。（ ）
11. 在水溶液中，蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点。（ ）
12. 在蛋白质和多肽中，只有一种连接氨基酸残基的共价键，即肽键。（ ）
13.蛋白质分子中的亚基是指参与构成蛋白质四级结构的具有独立三级结构的多肽链。（）
14．属于酸性氨基酸的是Glu 和Asp。（ ）
15．竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。（ ）
16．脯氨酸多的肽链中，蛋白质的α-螺旋结构较难形成。（ ）
17．蛋白质的二级结构就是α-螺旋结构。（ ）
18．酶的Km愈大表明酶对底物的亲和性愈大。（ ）
19．维系酶活性中心结构的力主要是氨基酸侧链之间的氢键。（ ）
20．酶的最适温度与酶的作用时间有关,作用时间长,则最适温度高,作用时间短,则最适温度低 。（ ）
二、选择题（每小题2分，共40分）（在备选答案中有一个是正确的）
1.如下排列顺序的化合物：苯丙-赖-色-苯丙-亮-赖，可以认为 A.是一具有6个肽键的分子 B.是一碱性多肽 C.是一酸性多肽 D.是一中性多肽 E.以上均不是
2.下列氨基酸中哪一种不具备旋光性 A.亮氨酸 B.丙氨酸 C.甘氨酸 D.丝氨酸 E.缬氨酸
3.下列哪组氨基酸属于酸性氨基酸 A.赖氨酸和精氨酸 B.半胱氨酸和甲硫氨酸 C.谷氨酰胺和天冬酰胺 D.酪氨酸和色氨酸 E.谷氨酸和天冬氨酸
4.具有紫外吸收的氨基酸是
A.苏氨酸 B.谷氨酸 C.亮氨酸 D.酪氨酸
5.能用于测定蛋白质分子量的技术方法是 A.聚丙烯酰胺凝胶电泳 B.分子筛层析 C.超速离心 D.硫酸铵沉淀
6. 有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI为4.6；5.0；5.3；6.7；7.3。电泳时欲使
其中4种泳向正极，缓冲液的pH应该是
A．5．0 B．4．0 C．6．0 D．7．0 E．8．0
7.关于酶的活性中心，下列哪些是正确的
A.必需基团一定在酶的活性中心上
B.与底物结合时，其构象发生改变
C.含催化基团和结合基团
D.具有结合底物并使之转变成产物的能力
8．关于竞争性抑制的叙述，不正确的是
A.如果[I]恒定，增大[S]，抑制作用减弱
B.如果[S]恒定，增大[I]，抑制作用增强
C.[S]远大于[I]，抑制作用近于消失
D.竞争性抑制剂与底物结合在酶的相同部位上
E.竞争性抑制作用的动力学特征是Km值减小，Vmax不变
9．关于酶反应的初速度的叙述，下列哪项是正确的
A.是ν-[S]曲线上任何一点的速度
B.是产物生成量与时间呈线性关系时的速度
C.是产物对酶活性产生负反馈抑制时的速度
D.是反应速度对酶浓度呈矩形双曲线变化时的速度
E.是反应速度与底物浓度呈正比时的反应速度
10．蛋白质分子中-S-S-断裂的方法是（ ）
A、加尿素
B、透析法
C、加过甲酸
D、加重金属盐
11. 下列哪种方法可得到蛋白质的\"指纹\"图谱?
A.酸水解,然后凝胶过滤
B.彻底碱水解并用离子交换层析测定氨基酸的组成
C.用氨肽酶降解并测定被释放的氨基酸的组成
D.用胰蛋白酶降解,然后进行纸层析和纸电泳
E.用2,4-二硝基氟苯处理蛋白质
12. 有一多肽经酸水解后产生等摩尔的Lys，Gly和A1a.如用胰蛋白酶水解该肽，仅发现有游离的Gly和一种二肽。下列多肽的一级结构中，哪一个符合该肽的结构?
A. Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-Ala
B. Ala-Lys-Gly
C. Lys-Gly-Ala
D. Gly-Lys-Ala
E. Ala-Gly-Lys
13. 必需氨基酸是对（ ）而言的。
A、植物 B、动物 C、动物和植物 D、人和动物
14. 在下列所有氨基酸溶液中，不引起偏振光旋转的氨基酸是（ ）
A、丙氨酸 B、亮氨酸 C、甘氨酸 D、丝氨酸
15. 谷氨酸的pK’1(-COOH)为2.19，pK’2(-N+H3)为9.67，pK’3r(-COOH)为4.25，其pI是（ ）
A、4.25 B、3.22 C、6.96 D、5.93
16. 重金属Hg、Ag是一类( )
A、竞争性抑制剂 B、不可逆抑制剂
C、非竞争性抑制剂 D、反竞争性抑制剂
17. 某酶今有4种底物(S)，其Km值如下，该酶的最适底物为（ ）
A、S1：Km＝5×10-5M B、S2：Km＝1×10-5M
C、S3：Km＝10×10-5M D、S4：Km＝0.1×10-5M
18. 酶的非竞争性抑制剂对酶促反应的影响是：（ ）
A、Vmax不变，Km增大 B、Vmax不变，Km减小
C、Vmax增大，Km不变 D、Vmax减小，Km不变
19. 酶原是酶的 前体（ ）
A、有活性 B、无活性 C、提高活性 D、降低活性
20. 天然蛋白质中不存在的氨基酸是（ ）
A、半胱氨酸 B、瓜氨酸 C、丝氨酸 D、蛋氨酸
三、填空题（每空1分，共15分）
1．蛋白质序列测定步骤是1 __多肽链的拆分; ___________2____测定蛋白质分子中的多肽链数目_____________3 _________二硫键的断裂；______4_________测定每条多肽链的氨基酸组成，并计算出氨基酸成分的分子比；_____5_________分析多肽链的N-未端和C-末端；_____6_______多肽链断裂成多个肽段__7________测定每个肽段的氨基酸顺序____8________确定多肽链片段的顺序_____ 9_确定原多肽链中的二硫键__ 。
2．通常将酶分为_______氧化还原酶___、___转移酶____、__水解酶_____、________裂合酶_______、_异构酶___和__合成酶___等六大类。
四、问答题（25分）
1.有一个基因工程产物蛋白质：MW 5.4 KD，PI6.3，请你写出分离该蛋白质的方案。（10分）
首先要粗提取，把所有蛋白质提取出来，然后再根据分子量，采用超滤的方法分离目的蛋白以外的杂蛋白；然后采用分子筛层析，离子交换层析，等电点聚焦层析或亲和层析分离蛋白。其中非常重要一点是是否写出在整个分离过程中要选择一个跟踪鉴定的方法。
粗提: 1．先把所有蛋白质提取出来,即用NaCl 、丙酮、乙醇将蛋白质在低温（0-4oC)沉淀出来。
2.用中空纤维，截流值6KD的中空纤维，将6万分子量的蛋白质去除； 再 用截流值为4.5KD的中空纤维，将4万分子量的杂蛋白去除。
精提：1. 离子交换
2. 分子筛
3．亲和层析
4．等电点沉淀
跟踪测定： 分子量大小（SDS-PAGE）；PI 测定。
2．一个抗菌素多肽经酸完全水解后得知含有亮氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，缬氨酸和赖氨酸，并以等分子存在。分子量测得约1170KD，C-未端分析结果证明是阴性，用胰蛋白酶水解后的产物经电泳和纸层析分离得到一个点子,用DNFB 处理后的酸水解液中只生成DNs-E-Lys,用部分水解可产生下列一些二肽和三肽：
（1）亮氨酸—苯丙氨酸，(2)苯丙氨酸—脯氨酸;（3） 苯丙氨酸—脯氨酸—缬氨酸，（4）赖氨酸—亮氨酸;（5）缬氨酸—赖氨酸；（6） 脯氨酸—缬氨酸—赖氨酸；（7） 赖氨酸—亮氨酸 。试问此多肽的结构和氨基酸的排列顺序怎样？
（共10分）
答： Leu-Phe-Pro-Val-Lys-Leu-Phe-Pro-Val-Lys 环形。
Leu- Phe
Phe-Pro
Phe-Pro-Val
Val-Lys
Pro-Val-Lys
Lys-Leu
Leu-Phe-Pro-Val-Lys-Leu-Phe-Pro-Val-Lys 3．写出20种常见氨基酸的英文缩写（三个字母）。分)
5
因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容