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鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒三重PCR检测方法

2020-08-20 来源:客趣旅游网
(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(21)申请号 CN201811432702.1 (22)申请日 2018.11.28

(71)申请人 北京市水产技术推广站

地址 102600 北京市大兴区经济技术开发区科创十四街99号1幢

(10)申请公布号 CN111235308A

(43)申请公布日 2020.06.05

(72)发明人 张文;徐立蒲;吕晓楠;王姝;王小亮;王静波;曹欢 (74)专利代理机构

代理人

(51)Int.CI

权利要求说明书 说明书 幅图

(54)发明名称

鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒三重PCR检测方法

(57)摘要

本发明公开了一种鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹

病毒三重PCR检测方法,该方法包括以下步骤:第一、选择与合成引物:选择扩增CEV P4a基因548bp片段,KHV TK基因409bp片段和KHV Sph基因292bp片段的3对特异性引物;第二、制备标准品:提取鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒的DNA,合成CEV P4a基因序列548bp片段,克隆到pEASY‑T1载体;合成KHV TK基因序列409bp片段和KHV Sph基因序列292bp片段,克隆到

PUC57‑Kan载体上,构建CEV‑P4a、KHV‑TK和KHV‑Sph标准质粒,根据质粒浓度计算拷贝数;第三、确定三重PCR退火温度及优化引物浓度。

法律状态

法律状态公告日

2020-06-05

公开

法律状态信息

公开

法律状态

权利要求说明书

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说明书

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