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抗着丝点蛋白B抗体阳性血清的抗核抗体荧光模式及其临床应用价值

2023-01-06 来源:客趣旅游网
国际检验医学杂志2013年12月第34卷第23期Int J LabMed,December 2013,Vo1.34,No.23 ·临床检验研究论著· 抗着丝点蛋白B抗体阳性血清的抗核抗体荧光模式及其临床应用价值 朱 蓉,孙明忠,居会祥,周中卫,肖丽华 (东南大学医学院附属盐城医院医学检验中心,江苏盐城224001) 摘要:目的探讨抗着丝点蛋白B抗体(CENP—B)阳性血清抗核抗体(ANA)荧光模式及其临床应用价值。方法 对96例 抗CENp-B抗体阳性血清的ANA荧光模式、滴度、分布及临床诊断进行回顾性分析。结果 96例抗CENP—B抗体阳性血清中, 单纯性抗CENp-B抗体阳性(+/一)为46例(47.9Vo),+/一组和+/+组的荧光模式比较,差异有统计学意义(P<0.01)。 <1:1 000和≥1:1 000的核型滴度组抗CENP—B抗体阳性强度的差异有统计学意义(P<0.01);+/一组的自身免疫性疾病 (AID)患者主要为系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征、系统性硬化症、原发性胆汁性肝硬化和雷诺综合征;非AID患者 中,主要多见于脑梗死、贫血和Ⅱ型糖尿病患者。结论DOI:10.3969/j.issn.1673—4130.2013.23.026 抗CEN B抗体在脑梗死、贫血和Ⅱ型糖尿病患者中的较高表达值得关注。 文献标识码:A 文章编号:l673—4130(2013)23—3162一O2 关键词:抗体,抗核; 脑梗死; 贫血;糖尿病,2型; 抗着丝点蛋白B抗体 Fluorescence patterns of anti—nuclear antibody of positive serum of anti-centromere protein B antibody and its clinical application values Zhu Rong,Sun Mingzhong,Ju Huixiang,Zhou Zhongwei,Xiao Lihua (Center for Medical Laboratory,Yancheng Hospital A{{iliated to Medical School of Southeast University,Yancheng,Jiangsu 224001,China) Abstract:Objective To investigate the fluorescence patterns of anti-nuclear antibody(ANA)of positive serum of anti—centro— mere protein B(CENP-B)antibody arid its clinical application values.Methods The fluorescence patterns,titers,distribution of ANA of 96 samples of anti—CENP—B antibody-positive serum and clinical diagnosis were retrospectively analyzed.Results Among 96 samples of anti—CENP—B antibody-positive serum,46(47.9 )samples were found simple anti—CENP-B antibody positive(+/ 一).Compared with fluorescence patterns in+/一group and+/+group,difference had statistical significance(P<0.O1). Difference of anti—CENP—B antibody intensity between<1:1000 and≥1:1000 karyotype titer groups showed statistical signifi— cance(P<0.01).Systematic lupus erythematosus,rheumatoid arthritis,Sjogren s syndrome,systemic sclerosis,primary biliary cir— rhosis,and Raynaud 8 syndrome were the main disease which were found in patients with autoimmune diseases(AID)in+/一 group,while cerebral infarction,anemia and type II diabetes were mainly prevalent in non-AID patients.Conclusion It should be pay attention for the high expression of anti—CENP—B antibody in patients with cerebral infarction,anemia and type lI diabetes. Key words:antibodies,antinuclear; brain infarction; anemia;diabetes mellitus,type 2 抗着丝点抗体(ACA)的靶抗原为着丝点蛋白,通常有抗 cENP—A、B、c抗体3种,抗cENP—B抗体最常见,大多数ACA 阳性血清至少与其中2种抗原反应,且中和CENP—B反应_1]。 能与CENP—B发生反应的血清为抗CENP—B抗体阳性血清。 着丝点是纺锤丝在染色体七附着点,细胞分裂时着丝点和纺锤 丝收缩使染色单体向细胞两极移动。目前,抗CENP-B抗体是 式的判断实行2人互盲报告制度,如遇有分歧或疑义的模式咨 询欧蒙技术人员再行确定。荧光模式分单纯着丝点型、着丝点 混合型(含着丝点型和其他核型)和其他型(不含着丝点型的其 他核型)3组。按核型滴度分2组:<1:1000、≥l:1000组。 uA检测ANA有15种特异性抗体[每根膜条上依次包被高 纯化nRNP/Sm、Sm、SS-A、Ro一52、S B、Scl一70、PM—Scl、Jo一1、 临床上相对少见的自身抗体口]。现就抗CENP-B抗体阳性的血 清进行分析,以探讨其ANA荧光模型、滴度及临床应用价值。 1资料与方法 CENP—B、增殖细胞核抗原(PCNA)、dsDNA、核小体、组蛋白、 核糖体P蛋白和抗线粒体抗体M2亚型(AMA—M2),共15种 靶抗原]。按ANA的结果分为A、B 2组,A组为抗CENP—B 2011年l2月至2013年3月在本院检测抗核 抗体阳性,其他14种特异性抗体阴性(+/一),B组为抗 CENP—B抗体阳性,同时,其他14种特异性抗体也有一种或多 种阳性(+/+)。抗CENP—B抗体阳性强弱的判读根据扫描仪 EuR0 Line Scan软件扫描结果,依着色强度分为+/一(6~ 10)、+(11~25)、++(26~50)、+++(51~56)4组。 1.1一般资料抗体(ANA)的门诊或住院患者3 315例中,抗CENP-B抗体阳 性的患者96例,其中,男14例,女82例。男不超过4O岁3 例,≥41岁l1例;女不超过4o岁12例,≥41岁7O例。96例 患者中能查询到临床明确诊断的8l例,自身免疫性疾病 (AID)符合美国风湿病学会诊断标准,其他疾病诊断均符合现 有疾病诊断的相关标准。 1.3统计学处理 采用SPSS18.0软件进行统计学分析,计 数资料用Y 检验,以a一0.05为检验水准,以P<0.05为差异 有统计‘学意义。 2结 果 1.2主要试剂和检测方法 试剂均购自德国欧蒙诊断公司, ANA用间接免疫荧光法(1IF),ANA用线性免疫印迹法 (I IA),操作严格按各试剂盒说明书进行。IIF检测中,荧光模 抗CENP—B抗体总体阳性率为2.9 (96/3 315),单纯抗 作者简介:朱蓉(1973~),女,副主任技师,主要从事临床分子生物学和免疫学检验工作。 国际检验医学杂志2013年12月第34卷第23期Im J LabMed,December 2013,Vo1.34,No.23 CENP—B抗体阳性占抗CENP-B抗体阳性的47.9 (46/96)。 抗CENP—B抗体阳性的患者中,男女之比为1.0:5.9。抗 CENP—B抗体阳性患者中,≤4O岁的15例,≥41岁的81例, 性者荧光模式的统计中,着丝点型占3%的结果是较为一致 的,只是讨论的角度不同。抗CENP—B抗体阳性患者中,女性 明显多于男性,高年龄组阳性率明显高于低年龄组,这一特性 与其他特异性自身抗体是相同的。 +/一组患者ANA荧光模式以单纯着丝点型为主,而其 他荧光模式的存在可能是因为其他荧光模式相对应的抗原不 二者之比为1.0:5.4。+/一组患者ANA荧光模式以单纯着 丝点型为主,占82.6 (38/46)。+/+组患者ANA荧光模式 以着丝点混合型为主,占58.0 (29/5O)。+/一组和+/+组 间荧光模式的差异有统计学意义(Y。一26.28,P<0.O1)。单 纯着丝点型和着丝点混合型患者ANA的差异均有统计学意 义(x 一24.93 P<O.01; 一23.27,P<0.01)。其他型患者 ANA的差异无统计学意义(Y 一0.38,P>0.05)。抗CENP-B 抗体的强弱与荧光核型滴度间的关系见表1。<1:1 000、 在膜条包被的15种靶抗原中,或到目前止还没有发现其相对 应的靶抗原。IIF法检测ANA时,每个反应区包被2种抗原 基质,Hep-2细胞和鼠肝组织冰冻切片中含有的抗原信息量包 括细胞核、细胞质、细胞膜,细胞骨架等,远多于膜条中的15种 抗原。如吴丽娜等_4 报道,核点型和核膜型在欧蒙的ANA 15 9 ¨3 3 2 2 4 2 2 1 ≥1:1 000核型滴度组间比较,抗CENP—B抗体阳性强弱的差 异有统计学意义(Y 一25.66,P<O.01)。十/一组和+++组 核型滴度间的差异有统计学意义(Y 一16.22,P<0.01;x 一 l4.93,P<O.01)。+组和++组核型滴度间的差异无统计学 意义(Y 一0.00,P>0.05;Y 一2.51,P>0.05)。 表1 抗CENP-B抗体的强弱与核型滴度间的例数分布 抗CENP—B抗体在不同疾病中的表达见表2。在39例单 纯抗CENP-B抗体阳性者中,AID患者占41.0 (16/39),非 AID患者占59.0 (Z3/39),差异无统计学意义(Y 一2.51, P>0.05)。AID患者主要为系统性红斑狼疮、类风湿性关节 炎、干燥综合征、系统性硬化症、原发性胆汁性肝硬化和雷诺综 合征患者。非AID患者中,主要多见于脑梗死、贫血和Ⅱ型糖 尿病患者。81例抗CENP—B抗体阳性者,两核型滴度组间的 差异有统计学意义(Y 一37.56,P<O.01)。 表2 81例抗CENP—B抗体在不同疾病中的表达( ) ANA 滴度 疾病 n AID 41 系统性红斑狼疮 13 类风湿性关节炎 5 干燥综合征 6 系统性硬化症 3 原发性胆汁性肝硬化 5 雷诺综合征 4 其他结缔组织病 5 非AID 40 肝脏疾病 7 肾脏疾病 4 肺部疾病 3 脑梗死 1O 贫血 5 糖尿病(Ⅱ型)4 其他 7 3讨 论 抗CENP—B抗体是ANA的一种,1980年应用IIF法首先 在硬皮病患者血清中发现,它的总体阳性率较低为2.9 ,在 临床中是相对少见的自身抗体。这与周仁芳等 对ANA阳 项中没有特异性抗体。李琳芸_5 报道,抗细胞质型对应的特异 性抗体检出率低,可能为常规抗体谱以外的其他抗体。 +/+组患者ANA荧光模式以着丝点混合型为主,而单 纯着丝点型也占32.0 (16/50),这可能是因为其他抗体对应 n 3 5 的荧光模式相对强度较弱,被主要着丝点型掩盖或其滴度低于 起始稀释滴度(1:100)而不能看出,而uA法膜条上包被的 都是对应的高浓度抗原,所以其相关抗体可以表达。在以后的 研究中,要注意把+/+组中ANA荧光模式是单纯着丝点型 的这一类的血清降低稀释度,如1:40、1:80,再观其荧光模式, 以判断是否有除着丝点型外的其他荧光模式。 有研究l_6 认为,着丝点型之外还存在其他荧光核型,如核 颗粒型也能表现出抗CENP—B抗体阳性。也有研究l3 认为,着 丝点型与特异性抗体抗CENP—B抗体为100 吻合。笔者发 现,其他型中以核颗粒型和核仁型为主,且抗CENP-B抗体多 为弱阳性,这说明可能是因为着丝点型荧光过弱被主要核型掩 盖,不易分辨,而uA法膜条上包被的都是对应的高浓度 CENP—B抗原,故结果为ANA荧光着丝点型阴性,而膜条中抗 CENP—B抗体阳性。 抗CENP—B抗体的强弱与着丝点型滴度间有一定的对应 关系,但又不完全是正对应关系,因为+/一和+++两组核型 滴度差异有统计学意义,而+和++两组滴度的差异无统计学 差异。 抗CENP-B抗体在不同疾病中的表达说明,抗CENP—B 抗体可出现在多种疾病中,对临床疾病的诊断无特异性 ]。有 人认为抗CENP—B抗体与雷诺现象有密切关系 ]。有人认为 抗CENP—B抗体是CREST综合征的特异性抗体_g]。也有报 道_ 1认为ACA阳性并非CREST综合征的特异性抗体。抗 CENP—B抗体在系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合 征、系统性硬化症、原发性胆汁性肝硬化、雷诺综合征和肝病等 患者中都有表达,这与相关研究 ”]基本一致,但在阳性率上 有差别,可能与研究对象的量及疾病的组成不同有关。本研究 还发现,在非AID患者中,抗CENP—B抗体阳性主要多见于脑 梗死伴高血压、贫血和Ⅱ型糖尿病患者。7例脑梗死患者中有 5例伴高血压。4例贫血患者有1例是缺铁性贫血,3例是巨 幼红细胞性贫血。抗CENP—B抗体对这些非AID疾病究竟有 着怎样的特异性,或者是否存在可能合并某种自身免疫性疾病 的预示,值得我们进一步探讨。 总之,单纯抗CENP—B抗体阳性血清的ANA荧光模式多 为单纯着丝点型,抗CENP—B抗体阳性,同时其他特异性抗体 阳性血清的ANA荧光模式多为着丝点混合型。抗CENP—B 抗体可出现在多种疾病中,对临床疾病的诊断无特异性。抗 CENP-B抗体在脑梗死、贫血和Ⅱ型糖尿病等非AID患者中 的较高表达值得关注。 (下转第3165页) 国际检验医学杂志2013年12月第34卷第23期Int J LabMed,December 2013,Vo1.34,No.23 表1 研究因素 研究因素的赋值及单因素非条件Logistic回归分析 定义及赋值无密切关系。 单因素分析 —— 系数值Wald 值P OR APTT是出血的独立危险因素,APTT延长既是消化道出 血的原因,也是出血的后果。肝硬化患者肝功能受损后,能发 挥正常功能的肝细胞减少,导致各种出、凝血相关因子合成减 少 ],APTT延长,内源性凝血功能降低,发生出血的概率增 加。该结果与国外的报道一致[1]。在发生血管破裂时,血管破 裂口不易被血栓阻塞,容易发生大出血。本研究提示,引起全 身出血的凝血因素在肝硬化门静脉高压症患者食管一胃底静脉 出血中有非常重要的作用 在食管一胃底静脉曲张的患者中监 测凝血功能,给予重建正常凝血机制的药物非常必要。 有研究表明,SAAG值与肝硬化患者上消化道出血的发生 呈显著相关,其预测出血的敏感性为100 ,特异性为 33.3 [ 。因此,构建SAAG的ROC曲线,具有重要的临床 意义,在截点值为18.5 g/L时,敏感性与1一特异性的乘积最 大,为84 。 综上所述,SAAG是一种良好的预测门静脉高压症患者消 化道出血的生化指标。 参考文献 [1]Barrera F,Riquelme A,Soza A,et a1.Platelet count/spleen diame— 表2 研究因素的多因素非条件Logistic回归分析 ter ratio for non—invasive prediction of high risk esophageal varices in cirrhotic patients1,J].Ann Hepatol,2009,8(4):325—330. ,123 Dittrich S,Yordi LM,de Mattos AA.The value of serum—ascites albumin gradient for the determination of portal hypertension in the diagnosis of ascites[J].Hepatogastroenter0l0gy,2001,48 3讨 论 (37):166-168. 门静脉高压症患者出现食管一胃底静脉破裂出血是其致死 的严重并发症,早期及准确预测是降低病死率的一级预防。腹 水在生成和吸收的动态中达到平衡,其形成因素包括门静脉压 力及腹腔积液的胶体渗透压,其吸收因素主要是血浆胶体渗透 压,而血清清蛋白是血浆胶体渗透压最重要的生成因子,所以 [3]刘思纯,谢鹏雁.血清腹水清蛋白梯度与渗漏出液概念临床价值 的比较[J].中华消化杂志,2002,22(3):175—176. [4]张辉,高春,房龙,等.血清腹水清蛋白梯度与肝硬化食管静脉曲 张程度的相关性EJ].世界华人消化杂志,2012,20(27):2608 2612. E53胡晓,程超,冯立民.乙型肝炎后肝硬化患者凝血功能和血浆I)_二 聚体水平与Child—Pugh肝功能分级的关系分析[J].现代检验医 学杂志,2013,28(2):60~62. r6]Mene A,Sharma D,Raina VK.Correlation between serurmascJtes al— bumin concentration gradient with gastrointestinal bleeding in patients SAAG在形成腹水中与门静脉压力达到平衡,sAAG等于门静 脉压力,也就是说,SAAG增高反映的是门静脉压力的增 高_l_3_,门静脉压力越高,食管一胃底静脉曲张越严重,发生破裂 的可能性加大。有研究显示,SAAG与静脉曲张的严重程度呈 正向线性相关 ]。对于肝功能的其他指标中,胆红素未发现与 出血间的相关性,而清蛋白单因素回归分析中显示的是保护因 素,因此,肝功能分级更多的是反映肝细胞的储备能力,与出血 (上接第3163页) 参考文献 口]Imafuku Y.Anticentromere antibody[J].Nihon Rinsho,2010,68 Suppl 6:¥506—509. of portal hypertension1,J],Trop Doct。2003,33(1):39 41. (牧稿日期:2013-09—03) (ACA)一positive ̄6gren S syndrome:a disease entity[J].Clin Exp Rheumatol,2013,31(2):163—164. 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