２０１２年 萄＞石榴＞梨。 ４讨论 右江民族医学院学报 第１期 目前食品中维生素Ｃ测定方法常用２，６一二氯酚靛酚滴定 法，２，６一二氯酚靛酚滴定法准确、可靠，操作简单、快速，无需 精密仪器，便于开展。在测定水果中维生素Ｃ含量时，由于滴 定终点为粉红色，对滴定终点的判断易受样品提取液中色素干 扰。果品如西瓜、柑桔提取液通常有颜色，致使终点不易辨别。 采用该方法滴定时，应采用活性炭或白陶土脱色再进行滴定。 对于青枣、梨、葡萄等花青素含量较低的果品，２，６一二氯酚靛 酚滴定法可以获得比较可靠的测定结果。水果中维生素Ｃ主 要为还原型维生素Ｃ，易被热、碱、氧破坏，在弱酸环境中较稳 定 ５，因此在制作果品提取液时，应加入草酸溶液，操作过程宜 迅速，避免还原型维生素Ｃ被氧化。 从测定结果来看，桂西地区常见的７种水果维生素Ｃ含 获取维生素Ｃ提供理论依据。有选择地适当地摄人富含维生 素Ｃ的果蔬，有益人民群众身体健康。另外，植物体内的维生 素Ｃ往往与维生素Ｃ酶同时存在，维生素Ｃ酶与空气接触时， 就会促进维生素Ｃ的氧化作用，所以新鲜的果蔬不宜久存。 参考文献： ［１］ 吴梧桐．生物化学［Ｍ］．６版．北京：人民卫生出版社， ２０１０：５４—５５． ［２］ 于长立．维生素Ｃ的研究与新作用［Ｊ］．吉林医学，２００８，２９ （２１）：１４５—１４７． 量：青枣＞柑橘＞西瓜＞葡萄＞香蕉＞石榴＞梨。有关资料表 明，ｌＯＯｇ上述水果中维生素Ｃ的标准含量分别为：青枣８５ｍｇ／ １００ｇ、柑橘４３ｍｇ／１００ｇ、西瓜６ｍｇ／ｌＯＯｇ、葡萄１５ｍｇ／１００ｇ、香蕉 ｌｌｍｇ／ｌＯＯｇ、石榴１３ｍｇ／１００ｇ、梨９ｍｇ／１００ｇ Ｊ。除西瓜外，其他 水果测量值均略低于或接近标准含量，这与被测样品的产地、 品种、生长条件、储存时间及测定误差等因素有关。 ［３］杨淑梅，杨晓梅．维生素Ｃ的研究动态及新的治疗前景 ［Ｊ］．中国医药导报，２００８，２８（５）：１１—１３． ［４］李韬．生物化学实验指导［Ｍ］．南宁：广西科学技术出版 社，２００７：９３—９４． ［５］郑集，陈均辉．普通生物化学［Ｍ］．北京：高等教育出版社， １９９８：２３６—２３９． ［６］ 中国预防医学科学院，营养与食品卫生研究所．食物成分 表（全国分省值）［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２００３：５９— ６９． 收稿日期：２０１１—１０—２１；修回日期：２０１１—１２—０２ 了解桂西地区水果中维生素Ｃ含量，为当地群众１３常膳食 百色市售三种牛奶中酪蛋白含量的测定与比较① 韦剑发 ，杨城 ，褶霖 。杨日芳 。马丹妮 。杨夏钰 ，朱晓莹 ② （１．右江民族医学院药学系２０１０级药本２班，广西百色５３３０００ Ｅ—ｍａｉｌ：１５４２５８０６４２＠ｑｑ．ｃｏｒｎ； ２．右江民族医学院生化教研室，广西百色５３３０００） 摘要：目的 采用等电沉淀法分别对百色市售蒙牛、伊利纯牛奶和皇氏水牛奶测定其酪蛋白含量，掌握等电沉淀法原 理，熟悉蛋白提取的基本过程。方法 采用等电沉淀法从牛奶中沉淀分离酪蛋白，再用乙醚和乙醇洗涤沉淀物，除去脂 类杂质，得到较纯的酪蛋白。结果 牛奶中酪蛋白含量分别为：伊利纯牛奶３．６５ｇ／１００ｍｌ、蒙牛纯牛奶３．４４ｇ／１００ｍｌ、皇 氏水牛奶３．３６ｇ／ｌＯＯｍｌ。结论 等电沉淀法能有效地提取牛奶中的酪蛋白，得率较高。 关键词：牛奶；酪蛋白；等电沉淀法 中图分类号：Ｒ３４—３３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—５８１７（２０１２）０１—００１５—０２ ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．ｉ００１—５８１７．２０１２．Ｏ１．００７ 牛奶营养丰富、易于消化吸收、物美价廉、是理想的天然食 品之一。酪蛋白是牛奶中最主要的蛋白质，酪蛋白含量约占牛 奶蛋白质总量的８０％…。酪蛋白含有人体必需的８种氨基酸， 易于消化吸收。酪蛋白进入机体后在胰蛋白酶等作用下，水解 成酪蛋白磷酸肽。研究表明，酪蛋白磷酸肽具有促进小肠吸收 矿物质，尤其是钙的吸收；促进牙齿、骨骼中钙的沉淀和钙化及 增强机体免疫力等功效Ｌ２ 】。酪蛋白是白色无味的物质，不溶 于水、乙醇及有机溶剂 Ｊ。等电沉淀（ｐｌ，Ｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃ ｐｏｉｎｔ）法提 取是利用蛋白质在溶液ｐＨ＝ｐＩ时，蛋白质在溶液中的溶解度 最低Ｌ５ 这一原理。酪蛋白ｐＩ＝４．７，将牛奶置于ｐＨ＝４．７的醋 酸盐溶液中，将酪蛋白沉淀出来。再利用酪蛋白不溶于乙醇、 公司）、伊利纯牛奶（内蒙古伊利实业集团股份有限公司）及皇 氏水牛奶（广西甲天下皇氏乳业集团有限公司）。 １．２主要试剂 醋酸一醋酸钠缓冲溶液（用酸度计调ｐＨ至 ４．７）、９５％乙醇、乙醇一乙醚混合液（乙醇：乙醚＝１：１）、无水乙 醚。所用试剂均为分析纯。 １．３仪器离心机ＴＤＬ８０（上海安亭科学仪器厂）、恒温水浴 锅ＨＨ・Ｗ２１・６００Ｓ（上海跃进医疗器械厂）、电子分析天平 ＰＬ２０３（上海梅特勒一托利多仪器有限公司）、２ＸＺ一０．５型旋片 真空泵（浙江黄岩黎明实业有限公司）、酸度计ＰＨＳ一３Ｃ（上海 伟业仪器厂）、烘箱Ｄ・ＨＧ一７８１（湖北省黄石市医疗器械厂）。 １．４等电沉淀法分离酪蛋白Ｉ６ Ｊ ①脱脂：三种牛奶各取１０ｍｌ 于离心管中，离心１０ｍｉｎ（３ ０００ｒ／ｍｉｎ）。取出后用药匙轻挑去上 乙醚的性质，用乙醇、乙醚洗涤沉淀物，去除脂类、磷脂等杂质， 从而得到较纯的酪蛋白。 对百色市售常见的蒙牛、伊利及皇氏纯牛奶三种牛奶的酪 蛋白含量进行测定，为辨别牛奶真伪提供一种参考。 １材料与方法 １．１材料市售盒装蒙牛纯牛奶（内蒙古蒙牛乳业股份有限 层脂肪层。②酪蛋白的沉淀：将去脂后的牛奶与１０ｍｌ ｐＨ４．７ 醋酸一醋酸钠缓冲液分别预热至４Ｏ℃，再将缓冲溶液缓慢倒人 牛奶中，并搅拌混匀。冷却至室温，离心１０ｍｉｎ（３ ０００ｒ／ｍｉｎ），弃 上清液，得酪蛋白粗品。③水洗：取５ｍｌ的蒸馏水洗涤酪蛋白 沉淀，离心１０ｍｉｎ（３ Ｏ００ｒ／ｍｉｎ）。重复三次。④再脱脂：用９５％ ①通讯作者②基金琢目：右江民族医学院教改立项项目（右医院字［２０１１］２８号） ，Ｅ—ｍａｉｌ：ｙｉｎｇｘｉａｏｚｈｕ＠ｙａｈｏｏ．ｃｎ 一１５— ２０１２年 右江民族医学院学报 第１期 乙醇洗沉淀一次，分别抽滤；再用乙醇一乙醚混合液洗两次，分 别抽滤；然后用乙醚洗两次，分别抽滤。⑤烘干称重：置于５０℃ 烘箱中烘干３．５ｈ，用电子天平称重。得纯品酪蛋白。 １．５计算结果 酪蛋白含量＝酪蛋白质量（克）／１００ｍｌ牛奶 得率＝（测得含量俚论含量）×１００％（式中理论含量为 ３．５ｇ／１００ｍｌ牛奶） ２结果 见表１。由表１可知，伊利纯牛奶酪蛋白含量最高，依次是 伊利纯牛奶＞蒙牛纯牛奶＞皇氏水牛奶。 表１三种牛奶酪蛋白提取结果（；±ｓ， ＝６） 量，这可能原因有：第一，生产方检测牛奶蛋白质含量的方法不 同，致使结果不同。第二，此次实验操作存在误差，导致酪蛋白 纯度不够，结果偏高。 ｐＩ法分离提取酪蛋白，简单方便，易于操作，得率也较高， 为牛奶质量鉴定和辨别市售牛奶的真伪提供了科学参考。实 验中需要注意以下事项：①向牛奶中滴加ｐＨ ４．７醋酸盐缓冲 液混合这一步非常关键，要边加边搅拌，速度适中，以防局部 ｐＨ过低影响蛋白质的活性。②用乙醇和乙醚洗涤酪蛋白沉淀 时，应将酪蛋白捣碎，并在溶剂中充分搅拌、浸泡，这样才能洗 净脂质，纯品酪蛋白为白色，若蛋白质发黄表明脂质未洗涤完 全。③抽滤过程所用乙醚是挥发性、有毒的有机溶剂，最好在 通风橱内操作。 参考文献： ［１］张建忠，郦一心．酪蛋白和酪蛋白制品的开发［Ｊ］．中国乳 品工业，１９９８，２６（６）：３１—３２． ［２］刘文，陈有亮．酪蛋白磷酸肽的功能及其制备［Ｊ］．科技通 报，２００８（１）：５５—５６． ３讨论 ［３］陈新风，郭荣富．酪蛋白磷酸肽及其营养作用［Ｊ］．饲料工 业，２００５（６）：１３—１５． ［４］Ｈａｒｔｍａｎｎ Ｒ，Ｈａｎｓ Ｍｅｉｓｅ１．Ｃｙｔｏｅｈｅｍｉｅａｌ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈｏｐｅｐｔｉｄｅｓ ｄｅｒｉｖａｌ ｆｒｏｍ ｃａｓｅｉｎ ａｓ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｉｍｇｒｅｄｉｅｎｔｓ 牛奶的质量高低主要取决于蛋白质含量的多少，对牛奶中 酪蛋白含量进行测定有助于了解市售各个品牌牛奶的质量高 低。此次实验结果表明，伊利纯牛奶酪蛋白含量最高，依次是 蒙牛纯牛奶、皇氏水牛奶；而且三种品牌的牛奶以皇氏水牛奶 售价较高，蒙牛和伊利售价相当，所以伊利纯牛奶的性价比最 高，为我们以后补充营养和合理膳食提供参考。 另外，各品牌牛奶包装盒上标示蛋白质含量分别如下：蒙 牛３．０ｇ／１００ｍｌ、伊利３．１ｇ／１００ｍｌ、皇氏３．０ｇ／１００ｍｌ。通过数据 的对比分析，这三个品牌牛奶的蛋白质标示均低于理论含量 ３．５ｇ／１００ｍｌ，而实验结果均接近于理论含量，高于品牌标示含 ｆｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｆｏｏｄ［Ｊ］．Ｎａｈａｎｇ Ｆｏｏｄ，２００２，４６（６）：４２７— ４５１． ［５］ 吴梧桐．生物化学［Ｍ］．６版．北京：人民卫生出版社， ２０１０：８８—８９． ［６］李韬．生物化学实验指导［Ｍ］．南宁：广西科学技术出版 社，２００７：３６—３７． 收稿日期：２０１１—１Ｏ一２０；修回日期：２０１１—１２—０２ 小鼠急性高位脊髓损伤对心电图的影响 林佳杰 。陈玉华 。刘诗婷１。赵善民 ① （１．右江民族医学院２００８级临床医学本科，广西百色５３３０００ Ｅ—ｍａｉｌ：ｄｏｃｔｏｒｌｊｊ＠１６３．ｃｏｍ； ２．右江民族医学院生理教研室，广西百色５３３０００） 摘 要：目的 探讨小白鼠急性高位脊髓损伤对心电图的影响。方法 在小白鼠背位颈部切开，找出第４或第５颈椎， 用５号针插入锥间达脊髓并横断，然后用心电图机描记高位脊髓损伤后的心电图变化。结果 小鼠在高位脊髓损伤后 的心电图变化规律为心率加快，Ｐ—Ｒ间期缩短，ＱＲＳ波时间缩短，Ｐ波电压升高，Ｒ波电压降低和Ｑ波电压升高（Ｐ＜ ０．０５）。结论 小鼠高位脊髓损伤对心电图有一定的影响，可为小鼠高位脊髓损伤后的血流动力学改变的判断提供参 考，可作为研究高位脊髓损伤后的因血流动力学变化所引起的一系列病理生理学改变提供参考指标。 关键词：小鼠；脊髓损伤；心电描记术 中图分类号：Ｒ３３—３３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—５８１７（２０１２）Ｏｌ一００１６—０２ ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００１—５８１７．２０１２．０１．００８ 心电图是临床常用的心脏疾病诊断手段之一。有关小鼠 心电图正常值的研究国内已报道【１１，但是有关小鼠急性高位脊 髓损伤后的心电图改变情况在国内还较少报告，针对这一现 试验中心提供）。 １．２心电图仪器ＥＣＧ一６５１１型（上海光电医用电子仪器有 状，探索小鼠在急性高位脊髓损伤后的心电图改变情况，并对 其进行初步的分析。 １材料与方法 １．１实验动物 昆明种小白鼠，健康活泼、毛色光泽，数量为 １４只，体重在２０－－２５ｇ，大小、雌雄均可（由右江民族医学院动物 ①通讯作者－Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｈｅｎｇｌｉｙｍｃｎ＠１２６．ｅｏｍ 一限公司），纸速为５０ｒａｍ／ｓ心电图仪，标准电压ｌｍＶ＝２０ｍｍ。 １．３心电图描记和实验方法 选择洁净、室内温度２６℃比较 恒定、无噪声的实验室。首先记录损伤前心电图，然后将小鼠 俯卧位固定在蛙板上，约ｌｍｉｎ待小鼠安静后，接上电极，记录 Ⅱ导联的心电图。记录完成后，用组织剪剪开小鼠背位颈部皮 肤，找到颈部第４或第５颈椎后用５号针刺入脊髓约１．５ｍｍ并 １６一